CMV与SP双启动子增强外源基因在小鼠骨骼肌中的表达效率.pdfVIP

维普资讯 ISSN l0o7．7626 中国生物化学与分子生物学报 2007年 7月 23(7)：554～559 CN 11-3870／Q ChineseJournalofBiochemistryandMolecularBiol CMV与 SP双启动子增强外源基因在小鼠骨骼肌中的表达效率 章倩倩¨，刘松财¨，戴建威¨，任晓慧 ，张永亮 ’ (。’吉林大学农学部 畜牧兽 医学 院，吉林 长春 130062； 华南农业大学动物科学学院，广东 广州 510642； 。’河北农业大学海洋学院，河北 秦皇岛 066O03) 摘要 构建分别含有 CMV、肌 肉特异启动子 SP及双启动子 CMV．SP的真核报告基 因 EG 表达载 体(pCMV．EGFP、pSP．EGFP及 pCMV．SP-EGFP)和生长激素释放 因子 (GRF)表达载体 (pCMV-GRF、 pSP-GRF和pCMV．SP-GRF)．将 3种EGFP表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌 ．注射后 1周、2周 、3周 以及4周时，分别提取肌 肉组织 RNA，应用半定量 RT．PCR检测报告基 因(EGFP)的表达量 ，发现 pCMV．SP．EGFP组 EGFP表达量显著高于pCMV．EGFP组和 pSP．EGFP组 (P0．01)；经荧光检测得 到了较强的荧光信号．将 3种GRF表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌 ，在注射后每 隔 10d记录小鼠 累积增重，采血并用RIA法测定血清胰 岛素样生长因子 I(IGF．I)浓度 ，结果 pCMV．SP-GRF组累 积增重、IGF．I浓度分别高于生理盐水组、pCMV．GRF组和 pSP．GRF组 (P0．05)．结果表明：CMV与 sP两种启动子组合，在小鼠骨骼肌 内使外源基 因表达效率提高．本研究为提高外源基 因在肌 肉组 织的表达提供 了新的途径． 关键词 CMV启动子 ；SP启动子 ；双启动子 ；EGFP；GRF；IGF．I 中图分类号 Q786；$852．23 TwoPromotersCM V andSP EnhancetheExpressionEfficacy ofanExogenousGenein SkeletalMuscleofM ice ZHANGQina-Qina ，LIUSong．Cai，DAIJina．Wei ，RENXiao．Hui’ ，ZHANGYong—Linag ’ ． (”CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，JilinUniversity，Changchun 130062．China； CollegeofAnimalScience，SouthChinaAgriculturalUniversity，Guangzhou 510642，China ； ColelgeofOcean，HebeiAgriculturalUniversity，Qinhuangdao 066003，Hebei，hCina ) Abstract Sixvectorswereconstructed，whichwerecarryingEGFP orGRF (pCMV．EGFP，pSP．EGFP， pCMV—SP-EGFP，pCMV-GRF，pSP-GRFnadpCMV．SP．GRF)drivenbyCMVpromoter，SPpromoterand CMV-SPpromoters．respectively．Theywereinjectedintoskel