NaCl预处理对拟南芥愈伤组织耐盐性的影响.pdfVIP

农业基础科学 现代农业科技 2012年第 2期 NaCI预处理对拟南芥愈伤组织耐盐性的影响 孙小洁 姜慧芳 (山东师范大学生命科学学院，山东济南 250014) 摘要 盐胁迫是制约农业生产的重要因素。在盐胁迫下 ，植物细胞离子均衡受到破坏，细胞质 中积 累过 多Na+，对植物细胞的代谢产生 伤害．主要表现在渗透胁迫、离子胁迫和氧化胁迫及代谢紊乱等方面。试验以拟南芥 菌苗诱导培育愈伤组织。用不同浓度的NaCl做预处 理。结果表明：未经NaG1预处理的愈伤组织在 200mmolL／NaC1的培养基上的生长状况较好。说 明NaC1预处理可能通过某种机制对愈伤 组织造成一定的损伤 ，从而为培育耐盐抗盐植株起到一定的启示。 关键词 NaC1预处理；拟南芥 ；愈伤组织；耐盐性 中图分类号 Q945．78 文献标识码 A 文章编号 1007—5739(2012)02—0032—02 全球盐碱地面积巨大，仅我国盐渍区面积就有9913万 导培养基上时，2组愈伤生长状况基本一致，均生长良好，形 hm2,其中很大一部分为耕地，且盐碱化还在不断加剧。长期 状为不规则的松散的颗粒状细胞团。随着NaC1浓度增大， 以来。对盐碱地开发利用的研究主要集中在盐碱地土壤的 A组部分愈伤组织变为褐色且逐渐死亡 ，部分存活下来 ， 改造和耐盐抗盐植物的培育fl】。一般来说 ，盐碱地主要是钠 而B组无明显变化 。由图2可以看 出，将 2组都转移到 200 盐含量过高，对植物具有盐胁迫。在盐胁迫下，通过渗透胁 mmol／LNaC1的MS诱导培养基后，A组出现变褐、凋亡现象 迫、离子毒害以及盐胁迫的次级反应如氧化胁迫等蠲，植物 的时间要早于B组，B组存活率高且颜色变化不明显。 细胞离子均衡受到破坏 ，细胞质中积累过多Na，对植物细 继代培养4周后 ，A组愈伤组织颜色明显变褐 (有的已 胞产生伤害 ，光合作用、蛋白质合成 、能量和油脂代谢等主 经凋亡)，而B组变化不明显，颜色轻微变褐。 要生理过程都会受到影响。植物的抗盐性 ．即对盐渍环境 的 适应机理主要是御盐和耐盐。御盐性植物通过拒盐、稀盐和 排盐来保持细胞质的低盐浓度 ，从而避免盐碱地高盐量对 植物的伤害。耐盐性植物则通过自身的生理代谢变化来抵 抗进入细胞盐分的危害，以适应高盐环境嘲。 1 材料与方法 1．1 试验材料 试验材料包括拟南芥野生型(co1)种子、MS培养基 (不 含激素)、MS诱导培养基(2，4一D2mg／L+KT0．2mgL)、75％ 酒精 、1％次氯酸钠 、无菌水、NaC1。 1．2 试验方法 图1 刚转移至 20ommol／LNaa 的MS诱导 1．2．1 拟南芥无菌苗的获得。将灭菌的种子接种到MS培养 培养基上的愈伤组织 基上 ，于4℃放置 2d后移到培养室。22℃、16h光照、8h黑 暗培养，光照强度 110~moU(m2·s)嗍。 1．2．2 培养诱导愈伤组织。待幼苗长至7d左右，剪取子叶 0．5cm2，接种到MS诱导培养基上。用石蜡膜封 口后放于黑 暗环境培养，每 2周继代 1次。4周形成生长状态良好的拟 南芥愈伤组织。 1．2．3 用NaCl对愈伤组织进行预处理。将拟南芥愈伤组 织分成A、B2组，A组在含有NaC1浓度依次为25、50、75、 100mrnol／L的MS诱导培养基上黑暗培养 1周 ；同时B组 图2 20ommol／LNaC1处理后的愈伤组织 在没有添加 NaCI的MS诱导培养基上继代培养 。每组 1O 注：右图为放大的愈伤组织。 个重复。 3 结论与讨论 1．2．4 用200mmol／LNaCl处理愈伤组织。将A、B2组愈伤