Poly I∶C刺激对裸鼹鼠体内自噬水平的影响.pdfVIP

Animaland Medicine 411 0ct．2014，34(5) 实验动物与比较医学LaboratoryComparative doi：10．3969巧．issn．1674—5817．2014．05．014 I：C刺激对裸鼹鼠体内自噬水平的影响 Poly 林丽芳，肖邦，赵善民，汤球，余琛琳，孙伟，张璐，蔡丽萍，徐晨，程继帅，崔淑芳 (第二军医大学实验动物中心，上海200433) [摘要]目的研究多聚肌苷一多聚胞苷酸钠盐(PolyI：C)对裸鼹鼠自噬水平的影响。方法成年 裸鼹鼠以及C57BM小鼠分别随机分成PolvI：C给药组和对照组，分别腹腔注射PolvI：C和生理盐 水。PolvI：c给药12h后，组织切片HE染色观察小肠组织的病理变化，电镜观察细胞结构的变 化，实时定量PcR检测小肠组织中炎症相关因子儿一1、A形5的mRNA表达情况，蛋白印迹检测 小肠组织中自噬相关蛋白Lc3B、Beclin1表达情况。结果P01vI：c给药后，裸鼹鼠小肠组织未 出现显著的病理变化，但c57BL／6小鼠小肠组织腺体部出现广泛性出血；电镜观察发现，裸鼹鼠 小肠组织细胞中线粒体增多、变长，自噬体数量显著增加，而小鼠组织细胞线粒体有大量的空泡 化，滑面内质网扩张；实时定量PcR检测未发现组织中儿一1、A弼5mRNA表达有显著变化；蛋 (P0．05)。结论PolyI：C给药引起裸鼹鼠自噬水平上调，同时，裸鼹鼠自噬水平的上调亦可以 提高机体的适应能力，进而起到抵抗P01vI：C损伤的作用。 【关键词]裸鼹鼠；多聚肌苷．多聚胞苷酸钠盐(PolyI：C)；炎症；自噬 [中图分类号]Q95—33【文献标识码]A 【文章编号]1674—5817(2014)05—0411—06 裸鼹鼠寿命长达28．3年，是同等体型啮齿类 与细胞受体一经结合便会产生诱导自噬发生。自噬 动物的7～10倍【112】，同时裸鼹鼠具有天然的抗肿瘤特一i仅是细胞内抵抗病毒感染的固有防线，同时它还 性，至今没有自发肿瘤的例子【3，制。此外研究显示很 能通过调节先天和获得性免疫通路来抵抗病毒感染， 多长寿命的动物模型能够耐受广谱的有害刺激[5-引。 此外，自噬还可以通过调节抗原递呈来影响获得性 裸鼹鼠属于掘地动物，洞穴环境阴暗潮湿，通风 免疫反应llo】。作者前期研究发现新生裸鼹鼠的自噬 条件不良，极易滋生各种微生物病原菌。有研究 水平显著高于新生C57BL／6小鼠，且裸鼹鼠成纤维 证实，与小鼠比较，裸鼹鼠细胞对很多有害物质(如 细胞的自噬能力也明显高于小鼠…】。裸鼹鼠细胞自 百草枯、高温、重金属、DNA损伤剂、有害异 噬可能是其抗病毒的重要原因。因此，奉实验通过 物等)具有更强的抗性【8．引。这提示裸鼹鼠在长期的 P01yI：C给药，以小鼠为对照，检测裸鼹鼠炎症反应 进化中演变出较强的抗疾病损伤能力。 及自噬水平，研究裸鼹鼠病毒感染状态下的自噬调节 由于病毒专门寄生于细胞内，其在感染过程 能力，为裸鼹鼠的抗逆性、抗肿瘤研究提供参考。 中必定会与自噬这一维持细胞自稳态的代谢过程发 生相互作用。现已证实，有些病毒(如水泡性口炎病 1材料与方法 毒、麻疹病毒、1型人获得性免疫缺陷综合征病毒) 1．1实验动物 8周龄C57BU6小鼠购自斯莱克实验动物公司 [收稿日期】2014—08—06 [基金项目】卜．海市科技发展基金项日(No．12140900200)、 (No和(N0联合资助 [作者简介]林丽芳(1986一)，女，助教 1．2仪器及试剂 time [通讯作者]崔淑芳，教授，E—mail：youngstar_sf@163