猪伪狂犬病诊断方法研究进展.pdfVIP

第30卷 2014 哈尔滨师范大学自然科学学报 V01．30．No．1 NATuRALSCIENCES 第1期 JOURNALOFHARBINNODALUNIVERSITY 猪伪狂犬病诊断方法研究进展 张雪云 (哈尔滨师范大学) 【摘要】概述了伪狂犬病的常用诊断方法：生物学实验、血清学诊断技术和 分子生物学诊断技术．生物学诊断方法包括动物实验和病毒分离鉴定等．在血清学 诊断技术方面，其诊断方法主要有微量血清中和试验、酶联免疫吸附试验、反向间 接血凝试验、荧光抗体技术和乳胶凝集试验、琼脂免疫扩散试验等．随着分子生物 学的发展，国内外相继建立核酸探针技术、聚合酶联反应技术、基因芯片技术、环介 导等温扩增技术、胶体金免疫层析技术等分子生物学诊断方法． 【关键词】猪伪狂犬病；诊断方法；进展 液(含双抗)研磨，12000 min，取上 wm离心10 0 引言 清液1～2mL，接种于实验动物(常用家兔)的后 伪狂犬病(PR)是由伪狂犬病毒((PRV)感 腿肌肉或腹部皮下，注射后48—96h内，注射部 染多种家畜和野生动物而引起的一种高度接触 位出现剧烈瘙痒和自咬症，甚至皮肤被撕开、出 性急性传染病，临床上主要表现为发热、奇痒(猪 血，四肢出现麻木，最后抽搐死亡，即可确诊为 除外)、繁殖障碍和脑脊髓炎…．猪是该病病毒最 PR．研究表明试验动物中兔对PRV强毒最敏感， J． 主要的传播者及长期贮存宿主，该病可引起哺乳 这是古典而可靠的方法H 仔猪出现神经症状、麻痹、严重的呼吸道疾病，最 后昏迷死亡，死亡率几乎100％；育肥猪则一般 2 病毒分离鉴定 不发生死亡，耐过后呈长期隐性感染带毒和排 鼻咽拭子、阴道拭子以及组织病料接种原代 毒，生长缓慢甚至成为僵猪；妊娠母猪表现为流 细胞系分离病毒，然后用电镜等方法鉴定．从敏 产、死胎或木乃伊胎等繁殖障碍心J．目前本病遍 感性特异性上考虑PRV的分离被认为是诊断的 布世界各地，已在50多个国家和地区发生了此 “黄金标准”．陈焕春等从猪的脑及内脏中分离 病，该病给全世界畜牧业造成经济损失每年可达 一株病毒，该病毒株在仓鼠肾传代细胞上连传 几十亿美元，给养猪业造成重大的经济损失，国 15代均出现典型病变，用适应BHK一21细胞的 际兽医局(OIE3)将其列为二类传染病¨J．为有 病毒接种鸡胚成纤维细胞、Hela细胞、Vero细胞 效防制该病，建立灵敏、特异、快速的诊断方法具 和原代犊牛辜丸细胞等均出现典型细胞病变，并 有重要的意义．至今国内外学者对诊断技术进行 在电镜下见到典型的伪狂犬病病毒粒子[5]． 研究，建立许多诊断方法，该文综述如下． 3血清抗体检测 1 动物接种实验 多数血清学方法可用于检测血清样品中的