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SRAP分子标记分析芫花遗传多样性.pdf

第26卷第5期 河南科学 V01.26No.5 2008年5月 HENAN 2008 SCIENCE May 文章编号:1004-3918(2008)05-0554-03 SRAP分子标记分析芫花遗传多样性 王从彦·, 李晓慧2, 胡 颖1, 郭二辉l, 田朝阳l (1.河南农业大学生命科学学院,郑州450002:2.河南省农业科学院园艺所,郑州450002) 摘要:采用SRAP分子标记对芜花的遗传多样性进行了分析.结果每对引物组合产生8—20条比较清晰的扩增 带.10对引物组合共产生473条扩增带.平均每对引物组合产生47.3条.10对引物组合共产生多态性带92条,每 对引物组合产生7一14条,平均为9.2条.每对引物组合产生的多态性带的比例为10.9%.29.I%,平均为19.44%. 结果表明,SRAP标记多态性还是较高的,可以用于分析芜花的遗传多样性. 关键词:芜花;SRAP分子标记;遗传多样性 中图分类号:O789 文献标识码:A 相关序列扩增多态性(Sequence.Related Amplified Read 开放阅读框(Open 故而近年来在植物遗传多样性分析阁、种质鉴定131、遗传连锁图的构建141、基因连锁标记的寻找与基因定位fll 植物中得以应用. 芫花花蕾可以入药.芫花花色较鲜艳,花簇生又可以做园林观赏.相关植物志记载河南仅有淡紫色或 紫红色的芫花18-Ol,而笔者发现河南野生芫花还有深紫色、紫色和白色等类型,推测可能是芫花发生变异所致. 本实验利用SRAP标记对芫花进行遗传多态性的研究,从而探讨芫花的遗传多样性,为其类型划分、新品种 选育提供一定的理论依据. 1材料与方法 1.1材料 供试材料取自河南省确山县野生芫花‰phnegenkwa),每份样本取10份样品. 1.2方法 1.2.1 mmol/L,购自上海生q-)1.5 提出的原则设计引物.PCR反应体系为:总体积25斗L:M矿(25 (10mmol/L,购自上海生工)0.2 mmol/L;正反引物(17 pmol/L,由上海生工合成)各30ng:Taq 40 (5 U;DNA U/ItL,购自上海生工)l min,72℃ 生产的iCycleriQ荧光PCR扩增仪上进行.热程序为:94℃变性5min;94℃变性lmin,35℃退火l 延伸lrain,共5个循环:94℃变性lrain,50℃退火lmin,72℃延伸l rain; min,共35个循环;72℃延伸5 4℃保存. 本实验所用引物序列如下: 正向引物Forward primer 反向引物Reverse primer reel:5’’rGAGTCCAAACCGGA’IA一3’eml:5’GACTGCGTACGAATrr(瓮一3’ me2:5’TGAG7rCCAAACCGGAGC一3’em2:5’GACTGCGTACGAATrGCA一3’ me3:57TGAGTCCAAACCGGACC一3’em3:5’GACTGCGTACGAATrAGC一3’ me4:5’TGAGTCCAAACCGG,rAG一3’em4:5’GACTGCGTACGAAT兀’AG一3

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