碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉制备ACE抑制肽研究.pdfVIP

第 10卷 第 1期 中 国 食 品 学 报 Vo1．10 No．1 20 10年 2月 JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology Feb．2 0 l0 碱性蛋白酶酶解魔芋飞粉制备ACE抑制肽研究 王 莉 徐怀德 贺学林 王 兴 (西北农林科技大学食品科学与工程学院 陕西杨凌 712100 榆林学院生命科学学院 陕西榆林 719000) 摘要 以水解度为指标 ，对碱性蛋 白酶酶解魔芋飞粉蛋白条件进行优化 ；测定不 同酶解阶段及不同分子质量魔 芋多肽的ACE抑制活性，筛选具有高ACE抑制活性的降血压多肽。结果表 明：在底物质量分数 2．25％，加酶量 3500U／(g底物)，温度 55℃，pH7．82的条件下酶解270rain，酶解产物的ACE抑制率达到最大值94．6％，此时 水解度 9．97％。多肽得率 12．26％；酶解液经浓缩、干燥得到的魔芋多肽粉呈淡黄色，多肽含量 52．62％，粗蛋 白含 量62．3O％；用葡聚糖凝胶 G一25和葡聚糖凝胶 G一15串联柱分离得到 2个具有高ACE抑制活性的多肽组分，其 分子质 量分别为 1500和 1000Da．半抑制质量浓度分别为 0．12mg／mL和 0．088mg／mL。 关键词 魔芋飞粉 ；酶解 ；血管紧张素转化酶 (ACE)抑制 率；凝胶 分离 文章编号 10o9—7848(2010)01—0042—06 在中国高血压患病人数多达 1．2亿 ，许多专 年产魔芋飞粉 1500～2000t。多作为低价饲料或 家、学者在研发安全 、高效的降压药l1l。目前 已经从 干燥剂出售 ，利用价值低 。魔芋飞粉含 20％蛋 白 大豆、玉米 、酪蛋 白、鱼等众多食 品的蛋 白酶解产 质 ，是生产多肽的良好原料。赵姗姗等用魔芋飞粉 物中提取分离出降血压肽。降血压肽也叫血管紧 制备魔芋高F值寡肽 【。王莉等用碱性蛋白酶酶解 张素转化酶 (ACE)抑制肽 ，可与 ACE的2个活性 魔芋飞粉制备抗氧化多肽 ，均说明魔芋多肽活性 功能区竞争性结合 ，抑制 ACE活性 ，从而抑制血 较高。本文用碱性蛋 白酶酶解魔芋飞粉蛋白制备 管紧张素I转化为血管紧张素 Ⅱ 。人体ACE活性 ACE抑制肽 ：用葡聚糖凝胶 G一25和葡聚糖凝胶 的升高会使心肌收缩加强、血管平滑肌收缩 ，最终 G一15串联柱分离得到高ACE抑制活性多肽 。为 导致血压升高3[1。降压肽的降血压效果温和、专一、 魔芋飞粉的开发利用提供理论依据。 持久 、安全性高且对正常血压无影响(无副作用)。 例如姚成虎等用 胃蛋 白酶酶解猪血 中珠蛋 白，制 1 材料与方法 备 ACE抑制肽4[J。殷金莲等用木瓜蛋白酶酶解 甲 1．1 材料与仪器 鱼肉，制备 ACE抑制肽 ；分离到分子质量为 307 原料 ：魔芋飞粉 (粗蛋 白含量 16。24％)，陕西 Da的肽 。具有较高的ACE抑制活性5J『。曾庆祝等 安康秦东食品有限公司提供 。 通过葡聚糖凝胶 G一25和葡聚糖凝胶 G一15凝胶 酶与主要试剂 ：碱性蛋白酶 (酶活 10000U／ 柱分离扇贝多肽 ．得到分子质量为 1300和 900 g)，英 国BDH公司；考马斯亮蓝 G一250等均为市 Da的肽，具有较强的ACE抑制活性同。 售分析纯试剂 ；酪蛋 白磷酸肽 (CPP)，江西可生生 魔芋飞粉是在魔芋精粉加工过程中产生的质 化有限公司；葡聚糖凝胶 G一25、葡聚糖凝胶 G一 量轻 、颗粒小的粉末[71，占精粉的30％一40％。全国 15，北京拜而迪生物公司；血管紧张素 I转换酶