2种不同方法纯化乳酸杆菌重组S-层融合蛋白的比较试验.pdfVIP

畜牧与饲料科学 AnimalHusbandryandFeedScience 2014，35(4)：8一l0 2种不同方法纯化乳酸杆菌重组 S一层融合蛋白的比较试验 小 琴 ，特尼格尔，赵 慧 ，格 日勒 图 (内蒙古农业大学兽 医学院，内蒙古 呼和浩特 010018) 摘要 ：将重组茵EcoliBL21(含重组质粒 pGEX—SLP)经IPTG诱导获得重组融合蛋 白GST—SLP，分别用非特 异性的氯化锂沉淀方法和特异性的Pierce~GSTSpinPurificationKit纯化方法 。将该融合蛋 白进行纯化 ．纯 化结果采用 SDS—PAGE方法进行鉴定。结果显示，2种方法均能够获得大小约为71ku的 目的融合蛋 白．但 氯化锂沉淀方法纯化效果不及 Pierce~GSTSpinPurificationKit方法。该研究结果为进一步研究乳酸杆菌 S一层蛋 白生物学特性提供了参考 关键词 ：重组菌EcoliBL21；融合蛋 白；纯化 ；鉴定 中图分类号：TQ937；Q7 文献标识码：A 文章顺序编号：1672—5190(2014)04—0008—03 ComparisonTestofRecombinantS—layerFusionPrOteinOfLactobacillusspp．Pnrifled byTWODifferentM ethods Xiaoqin．Tenigeer，ZHAOHUi，Geriletu (CollegeofVeterina~Medicine，InnerMongoliaAgriculturalUniversity，Hohhot 010018，China) Abstract：Therecombinant coliBL21 (containingrecombinantplasmidDGEX—SLP)wasinducedbyI G toobtain recombinantfusionproteinGST—SLP．Thisfusionproteinwaspurifiedbynon—specificlithium chlorideprecipitationandspecific Piercd GSTSpinPurificationKitpurificationmethod．ThepurifiedresultswereidentifiedbySDS—PAGE．Th eresultsshowed thatthetargetfusionproteinwiththesizeofabout71kucouldbepurifiedbyusingtwomethods．butthepurificationeffectby lithium chlorideprecipitationmethodwaslessthanthatof Pierceg(0GSTSpinPurification Kitpurific~ionmethod ． Th estudy resultsprovidedreferencesforfurtherresearchonthebiologicalcharacteristicsofS—layerproteinofLactobacillusspp．． Keywords：recombinant最 coliBL21；fusionprotein：purification：identification S一层蛋 白(S-layerprotein。SLP)是指 由一层 晶格 但普遍认为．S一层蛋 白是菌体适应环境的重要结构 ， 状排列的单分子蛋 白或糖蛋 白亚单位组成的胞浆外 其功能主要有维持细菌细胞的形状 、结合高分子质量 层结构 ]。它是位于某些革兰 氏阳性细菌 、革兰 氏阴 的酶类以及黏附、侵袭靶细胞等隅]。更为有趣的是，S一 性细菌以及古细菌细胞表面的独特结构．厚度约为 层蛋白高度有序的晶格结构