红叶芥叶色性状的cDNA-AFLP研究.pdfVIP

第30卷第 10期 西 南 大 学 学 报 (自然科学版) 2008年 10月 Vo1．3O NO．10 JournalofSouthwestUniversity(NaturalScienceEdition) Oct． 2008 文章编号 ：1673—9868(2008)10—0100—05 红叶芥叶色性状的cDNA—AFLP研究 宋 明， 桑 燕， 汤青林 ， 王志敏 ， 杨 洋 西南大学 园艺园林学院，重庆市蔬菜学重点实验室，重庆 400715 摘要 ：利用cDNAAFLP技术分析红叶芥叶片变红前后的基 因表达差异，共发现 6O条 目标条带，随机选取 5条差 异片段进行 了克 隆测序．结果发现其 中TDFv 。(149bp)属于芥菜叶绿体基 因片段 ，另外4条序列分别与拟南芥 中 编码二酰基甘油激酶、半胱氨酸肽酶、肽基脯氨酰顺反异构酶亲环型家族蛋 白、阿拉伯糖苷酶 ／木糖苷酶等具有一 定 的 同源性 ． 关 键 词 ：芥菜；叶色性状 ；cDNA AFIP 中图分类号：Q344 ．13 文献标识码 ：A 基因表达具有时空专一性 ，在不 同时间和不同组织部位发生特异性表达，从而决定一个生命体的形态 特征和生长发育进程．比较不同个体或物种之间、同一个体在不同生长发育时期 的基 因表达差异，探寻和 鉴别新 的生长发育相关基因已成为植物学研究领域的方向和热点之一． 芥菜 (BrassicajunceaCoss．)是我国重要的栽培蔬菜 、油料和调料作物 ，具有重要的经济价值．经过多 年的研究，芥菜在育种方面取得了一定的成绩 ，但其丰富的资源尚未得到很好 的开发利用．红叶芥是芥菜 当中一个非常独特的品种．前人在育种工作 中发现，红叶芥的叶片是逐渐变红的．植物的叶片呈色相当复 杂，与叶片细胞内色素的种类 、含量以及在叶片中的分布有关．由于普通叶片中叶绿素含量 比类胡萝 卜素 多，所以叶片总是呈现绿色．花色素苷是类黄酮次生代谢途径中的产物之一 ，可反应出红、蓝 、紫和红紫等 颜色u ，是叶色和花色多彩形成的主要原因．叶色突变的分子机制较为复杂，多种途径 中的基因突变会引 发变异．日前 ，对突变发生机制的推测主要有以下几种观点 ：① 叶绿素生物合成途径中的基因突变．② 血 红素一光敏色素生色团生物途径中基因突变．③ 编码叶绿体蛋白的基因突变．④与光合系统无直接关系的 基因突变． 许多学者对叶绿素突变及其遗传进行 了研究，不同叶色突变体的遗传规律相差很大，可能是质量性 状 ，也可能是数量性状 ，多数研究认为是核基因隐性突变 ，但也有人认为是细胞质遗传物质的突变．例如 ， 芽黄突变体大多受单一隐性核基因控制 ，少数受两对核基因控制 ．在胡萝 卜一个栽培种群中发现的黄色 叶突变体，其外型表现是由单一隐性核基因控制 j．与细胞核遗传的叶色突变体相比，细胞质突变体较少 ， 仅在小麦 、大豆 等少量作物中有报道．童南奎发现 ，红叶芥菜与绿叶芥菜杂交后 ，正反交 F1植株均表 现红色叶，F2表现出红叶株与绿 叶株 的分离 比为 208：70，与 3：1的分离 比无显著差异 ，测交为 95： 104，符合 1：1的分离 比例，因此 ，他认为芥菜红叶与绿叶为一对等位基因控制的质量性状 ，该对基因为 细胞核基因，红叶为显性性状 ．有关红叶芥叶片呈红色的机理 国内外很少有这方面的研究报道，所以对 于这一宝贵的芥菜资源的叶片呈色机理还有待深入研究．本文采用 cDNA—AFLP技术，研究了红叶芥变红 之前与变红之后的基因表达差异，以期找到芥菜红叶相关基 因，为以后红叶相关基因的克隆，分子标记辅 收稿 日期 ：2008—05—26 基金项 目：重庆市 自然科学基金资助项 目 (2006BB1334、2006BB1337)． 作者简介 ：宋 明(1956一)，重庆合川人 ，教授 ，主要从事蔬菜遗传育种与生物技术研究 第 10期 宋 明，等 ：红叶芥叶色性状的eDNA—AFLP研究 101 助育种等奠定基础 1 材料和方法 1．1 材 料 西南大学蔬菜实验室 自交多代保留的红叶芥． 在种植过程中我们发现 红叶芥在大概 4叶 1心的时候叶片会慢慢变红，但是具体时期并不好确定． 如果在叶片变红后给予红叶