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J or
基因重组H.PY i尿素酶A或B亚单位
生物活性、免疫活性检测
第一军医大学南方医院消化内科研究所(510515)旌理张亚历张振书
枨万岱阁殿元
疫活性。
方法:用酶联免疫吸附试验结合快速尿素酶试验检测rLreA、
rUreB生物学及免疫活
性。
结果:rUreA、rUreB加入尿素酶反应液,37℃作用5分钟,溶液呈黄色,反应时间延
长3小时,溶液仍保持黄色,与阴性对照超大型声粉碎物加入尿不比酶反应液,37℃作用
5分钟溶液颜色相同,而阳性对照组(尿素酶液中加入H.pylorJ活菌),2分钟溶液即变为
紫红色,表明rUreA、rUreB不能分解尿素产生氨,表现为尿素酶反应阴性。我们用H.PYlori
免疫吸附试验。发现rUreh与18例H.pylori阳性患难与共者血清进行酶联免疫吸附试验
超声粉碎物进行酶联免疫吸附试验。发现rUreB与24例H.pylori阳性患者血清进行酶联
免疫吸附试验进,23侧为阳性。
结论:rUreA或rbreB快速尿素酶试验阴性,表明其没有分解尿素的活性,提示rUreh
生的免疫反应能防治H.py]ori感染。
慢性胃病脾虚证患者胃窦粘膜’G和D细胞变化的探讨
第一军医大学南方医院全军消化内科研究所f510515)宋于刚刘利民张万岱
叶桂安姚永莉智发朝
粱卫江
本文报告了应用免疫组织化学方法标记G、D细胞并用医学图象处理系统对G、D细胞
进行定量分析的结果。
材料和方法:所有病例均来自本院消化科、中医科、肾内科门渗及住院病人。参照有
关文献分为以下7组:①正常组:共23例,平均年龄34.2岁。②脾胃虚寒组:共26例,平
均年龄37.6岁。③脾虚夹热组:共24例,平均年龄33.7岁。④胃阴不足组:共10例,平均
年龄41.2岁。⑤脾胃湿热组:共11例,平均年龄36.9岁。⑥肝胃不和组:共13例,平均年
龄37.7岁。⑦肾虚组:共9例,平均年龄33.1岁。
方法:
l、G、D细胞的免疫组化标记:内镜下从幽门口上2-3c$胃大弯侧3点处夹取胃窦粘
膜组织一块,4%多聚甲醛固定24小时,常规脱水,沿纵轴方向石蜡包埋,常规5微米连续
切片,免疫组化染色,在相邻切片上分别显示G、D细胞。染色方法的主要步骤按照sP试
剂盒方法进行,对照片:用PBS代替第一抗体,其余步骤与试验片相同。结果显示阳性鲴
胞的胞浆被染成棕黄色或深棕色,与阴性细胞形成鲜明对比,
2、G、D细胞的定量分析:免疫组化标记G细胞的每张切片在高倍镜(10×401下,
随机将5个视野的图象由电视摄像系统输入图像分析系统(MIPS)的主计算机.在电视监
视器显示下由主计算机系统进行_二值图像处理,测量G细胞的数目。取5个视野的均数作
为这张切片的G细胞的数目。
取与G细胞相邻的经免疫组化标记D细胞的切片,用上述方法测量并计算每张切片的
D细胞的数目。
结果:
1、G、D细胞的形态学观察:G细胞主要分布于胃窦粘膜的中、下l/3,偶见于粘膜上
部。其形态呈圆形、椭圆形、梭形、三角形或不规则形,有的G细胞发出细长突起,末端
呈棒状,伸向邻近细胞,有的细胞顶部可达腺腔。D细胞主要分布于胃窦粘膜的Fl/3.偶
见于粘膜中、上部。其形态与G细胞相似。
2、G、D细胞计数的~IIPS分析结果:
注:a、b、c、e、f分别表示被标记组和A、B、C、D、E、F组比较PO.05。
上表可以看出:l、脾胃虚寒组、脾虚夹热组、胃阴不足组和正常组、脾胃湿热组、肝
胃不和组相比较G细胞数目均显著下降。2、脾胃虚寒组、脾虚夹热组、胃阴不足组和正常
组、脾胃湿热组、肝胃不和组相比较D细胞数目均显著下降。3、脾胃虚寒组和胃阴不足组
较正常组相比G/D细胞比值均显著增高。
结论:本实验从组织形态学方面证实,慢性胃病脾虚证时G、D细胞数目减少、G/D细
胞比例失调,可能是导致慢性胃病脾虚证胃肠功能障碍的一个重要病理机制。
大鼠实验性胃溃疡自愈
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