21世纪生命科学飞跃发展地基础——基因工程.pdfVIP

·专家讲座· 21世纪生命科学飞跃发展的基础——基因工程 天津市第一中心医院急救医学研究所王夸选 基困工程是指在体外条件下．人工将DNA分子切割并重新拼接．形成一个新的杂合的I)NA分 子．然后将它导人微生物或哺乳动物细胞内．使该分子得到无性繁殖．并可使该基因在细胞中表达， 宿主细胞可产生出人类所需要的基因产物，或改造创造新的生物类型。过去认为这是不可超越的 难事．现代分子生物学的超常发展，引发了对棱(NA)、核糖核酸(剐A)、去氧核糖核酸(DNA)，处理 技术的进展，特别是分离、扩增方法及对多种细胞来源DNA片段的测序方法．均已成为全世界分子 生物学领域常规使用的技术。 在此基础上，全世界多个国家的科学家，以征服宇宙的气魂，于1990年启动了2(X)0—2005年人 C,enorae 类基因组计划(孙lmn 的路途要走，最终要弄清楚人类全数基因的位点、结构和基因对细胞功能的控制。它是揭开生物机 体奥秘的基础。这个世界发生的一切，都与之息息相关。为此，作此报告目的是促使我们的危重症 急救医学界同道，对此有个轮廓性的认识，便于追综新世纪的科学新耐代。此报告共分为三个部 ‘ 分。 一、基础知识的复习，二、基因工程的基本技术，三、人类基因组计划及后人类基因组计划的简 介．四、基因工程技术在医学方面的应用与展望。一、基础知识舶复习 (--1、DNA：生命来源的分子 、 DNA是细胞的基因物质．基因是生物传递信息及表达遗传信息的基本单位。故此DNA是生命 起源的分子。它包含细胞合成蛋白质所需的一切信息。DNA是决定细胞功能的分子。DNA最韧 转录成PuqA．并连续不断的翻译成为蛋白质(图)。 ．DNA的结构玎分为宏观与微观的二个方面。 1．宏观方面： DNA位于～切细胞的细胞桉内(成熟的RBC隧外)，它的特征是组成染色体的线样结构．每一 个线样结构都含有一个单个的DNA分子。人类的细胞棱包含有22对常染色体及一对性染色体 XX或XY。 人的白细胞经过培养及处理．可以分离出中期染色体，固定染色后，按其长度及着丝点的位置 可排列成22对常染色体及一条x和一条Y性染色体(如图)。2．微观方面： 分子水平的DNA为双螺旋结构，由二条糖和磷酸分子交替排列而成的核苷酸链。校管酸链的 一端为j’磷酸基称之为5端．另一端为未结合的3’一OH基称之为3’端。此二条链以相反的方向盘 旋。一条链的方向是5’一3’；另一条链的方向是3‘一5’。它们的外形犹如一个曲扭的梯子。梯子 二根支拄之间的横桥是多对氢链结台而成的碱基。碱基星固定的规律进行配对(bp)，它们总是腺 嘌岭(Adenine T)相配对，鸟嘌呤(Guanine C)相配对。 A)与胸腺嘧啶(Thyrni．c G)与胞嘧啶(Cyamine 在DNA的分子中，一条链上有一个A，另一条链上必定有一个T；同样，一条链上有一个G．另一条 链上必有一个c。由于二条链上碱基配对．具有埴定的互补性。因此，一条链上碱基的序列固定下 l 来、．按照碱基TL*I-的原则，即可决定另一条链上碱基的序列。碱基互补原则具有十分重要的生物学 意义，因为它不仅与核苷酸的结构有关，并且与DNA的复制、转录以及遗传信息的传递．都有密切 的关系(图)及(图)。 3．DNA与蛋白质的基因密码 DNA双链排列的序列形成基因密码，它决定每一个蛋白质分子的结构。每一个蛋白质分子包 含着属于自己序列的DNA片段。这种DNA片段称之为基因。由此产生了一个基因一个蛋白质分 子的定则，人类的多数基因排列成二个或多个DNA簇，它实琢是蛋白质的密码。 4．DNA的复制 DiNA是所有生物遗传的物质基础。在生物中遗传信息以遗传密码的形式，编码在DNA双链 上，表现为特定的核苷酸序列，并通过由亲代传递给子代。在子代的发育生长过程中，遗传信息通 过DNA转录成为RNA，然后由RNA翻译成为特定的蛋白质，通过蛋白质构成不同细胞的结构与细 胞酶，执行生命的各种功能．将生命的遗传特征表达出来，即由基因控制细胞的功能．并传给子代 (示意如图)。所谓的DNA复制是以亲代