ApoE%2fLDLR双基因缺失小鼠炎症相关基因与表达研究.pdf

摘要 冠心病、心肌梗塞等心脑血管病的主要原因，严重危害着人类健康，在西方发达 国家和我国一直是主要的死亡原因之一。AS是一种多因素疾病，它受多种遗传因 素和外界因素的影响。目前普遍被认为AS是由血脂代谢异常等多种因素引发的 一种慢性炎症性疾病，它涉及多种细胞类型和多种生物学过程参与，如脂类代谢、 细胞粘连、应激反应、细胞增殖和凋亡以及血液凝集，在每一生物学过程中又涉 及多种基因参与和调控。研究这些基因在AS发生发展过程中动态的时序表达特 征以及它们之间的相互作用机理，将有助于弄清该病的发病机理。 载脂蛋白E(apolipoproteiIlE，aopE)和低密度脂蛋白受体(10wdeIlsi锣 hpoproteiIl 双基因缺失引起的印oE及其主要受体途径受阻，普通饮食条件下就能表现出显著 的高脂血症和AS病变，是目前比较常用的一种AS模型小鼠。但目前对 apoE一亿Du一。小鼠和AS的研究多集中于血脂代谢方面，与血管炎症损伤的关系 基因缺失引发的脂代谢紊乱与血管炎症损伤的关系以及AS的炎症机制仍待进一 步研究。 chaill 乜加sc邱tionp01ymemse 症相关的重要基因在不同年龄段与野生型(惭ldtype，WT)小鼠肝脏和主动脉中 的时序表达差异，同时检测血脂和血清中炎症因子的变化，观察肝脏和主动脉内 膜的病理形态改变，综合分析上述变化与AS发生发展的关系。结果显示： 反应蛋白(C．reactive necrosis 年龄的增长表达量逐渐升高，分别于3和2月龄时达到峰值。甘露聚糖结合凝集 ApoE／LDLR双基因缺失小鼠炎症相关基因的表达研究 素(man玎ose binding 同龄Ⅵ小鼠相比均无显著差异。wT小鼠肝脏中所有靶基因各年龄段之间均无 显著变化。 受体2(toll．hke rec印tor-2，TLR2)、单核趋化蛋白l(monocyte adhesion moleCule一1，IC√～M一1)、血管粘 MCP．1)、细胞间粘附分子1(intercellular adllesion 附分子1(v笛clllar 月龄apoE√以DLR．／．，J、鼠主动脉中m．1 生长因子．Q(plateletd丽ved铲owm 和ICj蝴．1降至WT小鼠水平。核转录因子．KB(nuclear 抑制剂(i11]}曲itor-K 小鼠相比均无显著差异。WT小鼠中除Ⅲ．1p在2、3月龄较1月龄轻微上调外， 果基本吻合。 cholester01， 3)血生化学检测：各年龄阶段apoE√仡DU一。小鼠总胆固醇(total density TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白(10w 以及高密度脂蛋白(1li曲density low 度脂蛋白(oxidized 及OxU)L水平较同龄WT小鼠高出2．3倍。 4)病理形态学检测：1月龄apoE√儿DLR以小鼠主动脉内膜可观察到散在的轻 微的脂质沉积病变；肝脏可观察到明显的肝脏脂肪变性，大小不等的脂肪滴出现 于肝细胞质内。随年龄的增长至2和3月龄时，主动脉内膜病变区域增多，内膜 增厚：肝细胞中的脂肪滴较1月龄时明显增多，肝脏脂肪变性程度加重，小不等 的脂肪滴充满于肝细胞质内。14天龄印oE√．／LDL∥’小鼠以及各年龄段的WT小 H 山东师范大学硕士学位论文 鼠主动脉均未观察到明显的苏丹Ⅳ阳性染色区，肝脏中未观察到明显的油红O阳 性染色区。 以上结果提示：ApoE一．压。DLR小小鼠小鼠肝脏和主动脉中部分时序表达上调的 炎症相关基因以及血清中升高的n吓．a、皿．19及OxLI)L，推测与血脂紊乱、肝 高脂血症可能通过刺激肝脏和主动脉中炎症相关基因的时序表达，起始并扩大了 AS病变部位的炎症反应，共同促进AS的发生发展。 关键