11.α、β、γ晶状体蛋白保护RGCs存活与突起生长的体外筛选研究.pdfVIP

养3d和5d时，晶体蛋白组细胞活性显著高 的70.6％;2周时RGCS数下降到655±112 于对照组(P＜0.01)，DMEM激活的巨噬细胞 个/mm2，为正常值的32.2％;3周时RGCS 培养液组与对照组比差异不显著。两组巨噬 数下降到309±13个/mm2，为正常值的15.2 细胞培养液组间无显著差异。结论 1、晶体 ％，均显著高于对照组(P＜0.05)；结论 Long 蛋白对离体培养的RGCs存活和生长具有显 evens大鼠视神经切断伤后RGCS的死亡主 著直接促进作用，其最佳有效浓度为 要发生在7-14天。视神经切断伤后玻璃体 10-5g/L。晶体蛋白也可通过激活巨噬细胞 腔注射可溶性混合晶状体蛋白能够保护 对离体培养的RGCs存活和生长间接发挥作 RGCS延缓死亡，这种作用可以持续到切断伤 用，但以直接作用为主。2、巨噬细胞培养 3周以后。 液可促进离体培养的RGCs存活和生长，其 促进作用与巨噬细胞的激活物无关，且弱于 晶体蛋白(10-5g/L)的作用。 11.α、β、γ晶状体蛋白保护RGCs存活 和突起生长的体外筛选研究 刘康 王一 王艳华 牛建军 曾玉晓 10.混合晶状体蛋白对视网膜神经节细胞 第三军医大学西南眼科医院 400038 保护作用的在体研究 [摘要]目的 既往研究发现晶状体损伤可保 刘志敏 王一 任蕾 刘康 护视神经损伤后RGCs存活和促进轴突再生， 第三军医大学西南眼科医院 400038 并证明混合晶状体蛋白具有直接促进的作 [摘要]目的 利用大鼠视神经横断伤模型， 用，但α、β、γ晶状体蛋白各组分的作用 研究混合晶状体蛋白对视网膜神经节细胞 如何尚不清。本研究进一步探明混合晶状体 的保护作用。方法 将成年Longevens大鼠 蛋白各组分(α、β、γ)对离体培养的大 21只，随机分成3组，分别为伤后1，2，3 鼠RGCs存活和突起生长的作用。方法 采用 周组，每组7只。建立视神经完全损伤模型， 分子排阻凝胶色谱法分离纯化晶状体中各 于视神经切断前7天经上丘及外侧膝状体逆 主要可溶性晶状体蛋白(α、β、γ)，通 行标记视网膜神经节细胞。右眼经玻璃体腔 过SDS电泳、肽质量指纹图谱方法鉴 注射浓度为1x10-4g/(1)的混合晶体蛋白 定为目的蛋白质后，按组分别加入离体培养 5ul，左眼注射生理盐水5ul，分别于伤后1， 的RGCs的培养基中，观察RGCs的最长突起 2，3周对实验动物进行灌注、取材，作全视 长度和存活细胞数。结果 培养基中加入α 网膜铺片，于荧光显微镜下进行观察和RGCS. 晶状体蛋白的组，RGCs的最长突起长度和存 记数。4只大鼠8只眼的视网膜铺片获得正 活细胞数明显高于对照组，β-H晶状体蛋白 常成年Longevens视网膜神经节细胞密度 也有一定的促进RGCs突起生长和保护存活 参考值。结果 正常Longevens大鼠RGCS 的作用，γ晶状体蛋白无明显的促RGCs突 数为2036±271个/mm2，视神经切断伤后 起生长和保护存活的作用。结论 α、β晶 1-2周RGCS数迅速下降，玻璃体腔注射生理 状体蛋白有明显的促进体外培养的RGCs存 盐水组于在视神经切断伤后1周时下降到 活和突起生长的作用，尤其是α晶状体蛋白 1048±208个/mm2，为正常值的51.5％；视 作用最强，是一种晶状体源性神经保护物 神经切断伤后2周下降到364±28个/mm2， 质。 为正常值的17.9％，三周时下降到248±17 个/mm2，为正常值的12.2％。玻璃体腔注射 混合晶体蛋白组在视神经切断伤后1周 RGCS数下降到1437±140个/mm2，为正常值