东海近江牡蛎多糖的提纯与生物学活性研究.pdfVIP

覆毽Ir】。 第三届海洋生物高技术论坛 2005．08．19-23 东海近江牡蛎多糖的提纯和生物学活性研究 王俊‘，姚滢，张建鹏，刘军华，冯伟华‘，焦炳华 (上海第二军医大学生物化学与分子生物学教研室上海200433) rivularis) 摘要：目的：为深入研究近江牡蛎多糖的药用价值，我们对东海近江牡蛎(Ostrea 分离、纯化，得到牡蛎多糖(Oyster 法：采用热碱法提取，以低、中、高三种浓度进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变 态反应、NK细胞活性测定，抗体生成细胞的检测、碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细 胞实验、荷瘤小鼠脾淋巴细胞活力测定(MIr法)、红细胞超氧化物歧化酶活性测定。结果： 1 牡蛎多糖的分离提纯及总糖量的测定 用热碱法提取牡蛎多糖，获得牡蛎多糖粗品，呈白色粉末状，水溶性好。标准曲线的线 性同归进行计算，得同归方程： Y0．0037X+0．0281：R2=0．9931；r=0．996544 利用标准曲线算出总糖景： Y-=(Yl+Y2+Y3)，3=0．0322；代入标准方程，得X=I．1081pg·mL-1 结果为：含糖罩=1．1081／100100％=81．76％ 2牡蛎多糖对提高正常小鼠免疫功能的作用 2．1牡蛎多糖粗品低剂景组(2．5mg．mL一1)能有效的增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率 而中(5．0mg·mL一1)、高(10．Omg·mL-1)剂景组均无明显免疫增强作用(pO．05)。 2．2OPS低剂最组能非常显著的增强正常小鼠的迟发型变态反应(p0．01)。 茕组p0．05，表明低剂景OPS有增强小鼠抗体形成细胞活性作用，而中、高剂量则否。 2．4对照组与实验组相比，pO．01，且_二实验组之间相比p0．01，表明牡蛎多糖粗品 低剂最组(2．5mg．mL一1)有增强小鼠碳廓清作用，而其余■组未见明显作用。 3．牡蛎多糖溶液低剂晕组能1卜常显著的增加荷瘤小鼠的脾脏细胞的活力(p0．01)，而 中等剂量组未见明显作用，但高浓度组反而出现活力降低(pO．01)。 4．对照组分别与实验组相比，差异显著(p0．01)，然而3个实验组之间相比p0．05，表 明牡蛎多糖粗品有增强小鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力的作用，但未随实验浓度增 高jm活力增加。 通讯作者： 。冯伟华Email：fwh402@163．com 覆毽Ir】 第三届尊洋生糖膏技术论坛 200s．08．19-23 结论：我们采用东海近江牡蛎为材料，分离提纯出牡蛎多糖粗品，呈白色粉末状，水溶 性好，总糖量测定出牡蛎多糖含糖量高。 我们对OPS粗品进行小鼠脾淋巴细胞转化实验， 显示其有增强小鼠脾淋巴细胞转化功能的作用(p0．01)，说明能提高动物体非特异性的细胞 免疫功能。NK细胞活性测定结果表明，低浓度的OPS溶液均有增强小鼠NK细胞活性作用 (P0．01)，提示还能促进机体特异性的体液免疫功能。腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验结 果表明OPS粗品有增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性作用。颗粒异物(胶体碳)经静 注进入血循环后，迅速为单核巨噬细胞所清除，其消除的速率(碳廓清指数)反映了吞噬能 力。本实验的碳廓清实验结果表明OPS粗品有增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬颗粒异物的能力， -者结果提示OPS具有促进单核一巨噬细胞功能。T细胞免疫功能与机体的抗病毒、抗肿瘤 等多种功能有关，DHT是反应T细胞功能的指标。本试验中OPS溶液能非常显著的减弱正 常小鼠的迟发型变态反应(P0．01)，其足跖肿胀度显著，说明牡蛎能减轻正常小鼠的过敏 反应，提高小鼠细胞免疫功能。机体对抗原物质的免疫应答，是由免疫系统中各免疫细胞(包 括巨噬细胞、T细胞和B细胞等)相互协调、共同完成的。PFC的完成需上述各免疫细胞的 共同作用，因此可作为综合反应或评价机体免疫系统功能的一个客观指标。本试验中小鼠经 OPS作用后，对SRBC的免疫应答能力明显提高，给予不同剂量的OPS处理后低剂量组小 鼠的溶血．空斑数明显高-J二对照组，即产生特异性抗体IgM的B淋巴细胞即抗体生成细胞数明 显增多(PO．01)。 上述实验结