定量测定桔梗多糖苯酚-硫酸法研究.pdfVIP

The8lhNational onNaturalMedicinalMater}atResotlrces andAbs打a出 Symposium Pm∞edings 瑟古筐 全国第8届天然药物资源学术研讨会％^豢 定量测定桔梗多糖的苯酚一硫酸法研究木 李妍1，一，魏建和1，许旭东1，师凤华1，褚庆龙1 1．中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京，100193； 18 2．吉林农业大学，吉林长春，1301 摘要 目的：测定桔梗中多糖的含量，为选育出优良的桔梗品种的质量评价提供科学依据。方法：桔梗样品 用水提取，经多级处理除去杂质制得桔梗精制多糖，精制多糖溶解与苯酚一硫酸试剂显色；用精制多糖测得桔梗多 糖与葡萄糖的换算因子，采用苯酚一硫酸比色法测定桔梗样品中多糖的含量。结果：建立了一种苯酚一硫酸法测定 桔梗多糖质量分数的方法，其平均回收率为97．54％，R．SD=1．44％。对不同来源桔梗中多糖的质量分数进行测定， 其范围为8．54—20．28％。结论：此测定方法简便可行，桔梗多糖供试液在4h内显色稳定，重现性较好，可作为桔梗 多糖的测定方法。 关键词桔梗多糖；苯酚．硫酸法；定量测定 DC．)的根， grandiflorum 是一种药食同源的食品，用途广泛。桔梗多糖是一种菊糖型多聚糖，是桔梗食用品质的主要评价指 标，现代药理学研究发现桔梗多糖还具有多种生物活性，如免疫调节，祛痰，保肝，消炎，改善胰 岛素、增强机体免疫功能及抗肿瘤等；具有广阔的开发前景。 本实验室于2001年启动了对桔梗的优良品种选育的系统研究，并于2004年首次发现了桔梗雄性 不育种质，现己选育出不育率100％的桔梗细胞质雄性不育系、保持系、自交4代纯系，以及紫花、 粉花、白花等的一批纯合品系：并进一步开展了桔梗的品质育种工作。以往对桔梗的研究主要侧重 于桔梗中的皂苷类化学成分，而忽视了桔梗中的多糖类成分及质量控制的研究，但由于桔梗多糖广 泛的生物学活性和较高含量，因而选择其作为评价桔梗质量的重要指标之一具有重要意义。本文首 次建立了应用紫外．分光光度法测定桔梗中多糖含量的检测方法，该方法简便可行，桔梗多糖供试液 在4h内显色稳定，重现性较好，可作为桔梗总多糖含量的可靠测定方法。同时为选育出优良的桔梗 品种的质量评价提供科学依据。 1仪器、试剂与材料 1．I仪器(略) 1．2材料(略) 桔梗共10个样品，2007年11月初采自药用植物研究试验基地(北京市海淀区)，由魏建和博士 鉴定，每个样品随机取3株，60℃烘干，粉碎，放于干燥器中备用。 2方法与结果 2．1桔梗多糖的提取与精制 mL， 称取3种不同桔梗样品的粉末(已干燥)各10g，置索氏提取器中，加入石油醚(沸程6090℃)100 mL于90℃水浴回流lh，提取2次，抽滤，挥干乙醇； 90℃回流提取至无色，滤渣挥干；力n80％的乙醇200 滤渣力nlSOmL蒸馏水100℃水浴回流提取lh，过滤，滤渣重复提取两次。合并滤液冷却至室温后加入相 h，加热至95C恒温30 当于桔梗质量0．2％的蛋白酶，55V酶解，约2 s灭酶，冷却至室温，离心，取上清 ‘基金项目 国家自然科学基金面上项目(编 一42l一 on