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一 一 垒童茎竺竺墨塑堕塑堑垒堑些墨!!：塑
H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝索基因分子演化的研究
陈君彦“2李海燕”中之义2陈化兰1于康震“’毕英佐4
(1．中国农业科学J览哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室，
哈尔滨1
100026；4．华南农业大学动物科学学院，广州510642)
基因进行了序列测定和分析，并绘制了进化树。研究结果表明，15株H1N1SIV的}IA基因核甘酸全长为
I
点氨基酸组成为IPSIQSRG，具有非高致病力毒株分子特征；而其受体结合位点在HA蛋白上第226位是
关键词：猪流感病毒；血凝素；HINI亚型；序列分析；分子演化
8种不同
感病毒最重要的蛋白，它的裂解性、受体特异性和糖基化是决定流感病毒感染性和致病性的重要因素。1918
年美国首次报道的sI因与当时人群中流行的流感有许多相似之处而倍受关注，1931年才分离并鉴定了第
一株SINA]Swine／lowa／15／31(HINl)，即古典型HINl
近百年的历史，至今已在全球范围流行，近年来由于不同距型流感病毒的变异或重组产生的新亚型SIV，
给养猪业和人类健康带来了严重危害”I。
于流感病毒生息和变异，是世界流感新亚型出现和暴发的“疫源地川”I。为了解中国H1N1亚型SIV分离
株的分子流行病学和危害。本研究对二十一世纪初中国大陆部分分离株(包括11个广东株．2个福建株。2
个黑龙江株)的HA基因进行序列测定和分析，对其分子遗传演化进行了研究，现报告如下。
1．材料和方法
L
业科学院哈尔滨兽医研究所分离鉴定、保存并提供。用于本实验研究的均为第5代病毒。毒株名称及缩写
SW／GD／716／01
： (缩写 或 716)；
分别为 A／Swine／Guangdong／716／01(H1NZ)
A／Swine／Guangdon【g]59I／01(HINI)
24
： 尘亘苎坐生銎塑堕塑坐型翌些墨堑塑
(缩写SWIGDl605101或605)
1．2主要试剂
START
KIT测序反应试剂盒购自Beckman公司。
产品，CEQl。”DTCS．QUICK
1．3 SPF鸡胚
1．4 RT-PCR扩增按常规方法进行。
1．5 PCR产物回收克隆
克隆方法转化、蓝白斑筛选、PCR鉴定后，再按质粒小量提取试剂盒说明书纯化克隆质粒。
START
KIT测序反应试剂盒说明书进行测序反应：用
I．6序列测定与拼接 按CEQ’”DTCS．QUICK
Beckman公词的CEQll”8000GeneticAnalysis
率、绘制进化发育树。
表1流感病毒参考毒株
strainsusedin
virus
1 Influenza
Table polygenetieanalyses ．
Strains Abbreviation GenBank《accessionno．)
A／Swine／iowa／15／30(HINl)SW／IWIl5／30(|W30) AF091308
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