GPMV+NA-1株F基因真核质粒的构建与实验免疫研究.pdfVIP

禽类传染病一禽副粘病毒病 Sota弱毒、F48E9强毒、 63．6％一92．9％之间，其中与P68分离株的同源性比较高，为92．9％，与La Queensl锄d 而LaSota弱毒与F48E9强毒、Oueensland 79．5％和78．8％，F48E9强毒与Oueensland 和83．0％。刘芳宁等【lo】认为区域的变化从一个侧面局部反映了NDV毒株的变化，提示陕西地区流行 缘关系，在分析P基因同源性的基础上绘制了系统遗传进化树(图3-4)。从中可以看出，在分析的 P基因和P68分离株的P基因亲缘性最近，与La 20株毒株中，NDV／Pigeon，shx／China，2003 Sota和 F48E9的亲缘性处在两个分支；有亲缘关系最远的是NDV08．004分离株。试验结果提示， 秦岭之间的迁徙有关，还有待进一步研究。 尽管NDV只有一种血清型，但是不同毒株的毒力、致病性以及组织嗜性之间存在很大差异。根 据F基因的限制性酶切图谱以及序列资料可以将NDV分为9种不同基因型(I～Ⅸ)，不同基因型 NDV F蛋白存在较大差异【¨12J。F蛋白及其裂解位点是决定NDV毒力、致病性以及组织嗜性的主要 因素。最近研究发现v蛋白不仅对NDV的复制是必须的，而且和NDV毒力有关u引。P基凶编辑产 生的非结构蛋白V与NDV毒力和组织嗜性也有一定的关系。毒力不同的NDv分离株之间v蛋白 序列存在差异，这种差异与v蛋白对宿主细胞干扰素的拮抗作用有关u训。随着疫苗的普遍使用，ND 的暴发以低发病率、低死亡率、轻微呼吸道症状以及产蛋下降为主要特征的的所谓非典型ND成为 其流行的主要形式。应该指出，非典型ND的发生和流行除与受感染禽类和鸟类的免疫状况外，还 与病毒的毒力有关，包括NDv致病的基础分子F和HN两种糖蛋白的变异，但是否与P基因序列 变异引起编码的V蛋白导致病毒毒力变化有关还有待于进一步研究。 参考文献(膏) GPMV NA．1株F基因真核质粒的构建及实验免疫研究 刘举芳王昌庆丁壮}母连志丛彦龙 (吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春130062) 鹅副粘病毒病是1997年开始在我国江苏、广东、吉林等许多地区流行【1’21，并造成严重损失的 一种新的烈性传染病。该病以消化道病变为特征，具有很高的发病率和死亡率。鹅源副黏病毒(Goose 囊膜糖蛋白，是病毒毒力的决定因素口J。F蛋白具有促进病毒囊膜与宿主细胞膜融合的作用，从而 使病毒基因组进入宿主细胞。M蛋白对F、HN蛋白的致病性具有一定的协同作用一一J，是病毒出 芽的主要动力【6】，能调节病毒RNA的合成。本实验室一直致力于鹅源副粘病毒的研究，构建有以 杆状病毒为载体的含有F弱基冈的真核表达质粒PFF，【”，和以pCI—neo为载体的含有强毒株F基因 的核酸疫苗质粒pCI．F博o。目前国内外对强毒株F蛋白的免疫原性研究较多，而对弱毒株F蛋白的 F弱基因，并与pMD一18T载体连接，构建了F弱基因克隆质粒。将F弱基因克隆质粒与真核表达载 物，结果pCI．rF与pCI—F的保护力无显著差异，且二者都不及laSota疫苗。 1材科 基金项目：国家自然科学基金，吉林大学大学生创新基金课题 宰：通讯作者，Ding-zhu柚g@yahoo．com．cn 1056 第十三次学术研讨会会议论文集 1．1病毒、蕾种、载体、实验动物 鹅源副粘病毒分离株NA．1株由本室分离保存(MDT为59．6h、ICPI为l。65、ⅣPI为2．74)； pCI-F为未致弱的NA一1强毒株F基因真核表达重组质粒，由本实验室构建并保存：所用菌种为大肠 埃希氏菌DH5Ⅱ；表达载体pCI．neoV＆tof，购自Promega公司；1日龄未免疫罗曼公雏，购自长春 市北方种鸡场。 1．2试捐 Ribonucleaseinmbitor，DNAexn．action DNA gel l(it购自Vitagene公司。T4Ligase为Promega公