利用LC／MS检测中药总成分中各大类成分含量的方法学探讨.pdfVIP

本文经编委遴选，英文 哿通过ScienceDirect全球发行。 摘 要：目的：利用液相一质谱(LC—MS)技术检测总成分，并对其含量计算进行研究。方法：以感冒 中药复方YL2000为例 ，利用LC—MS测定其 中的总黄酮、总生物碱和总香豆素等主要大类成分，以 HPLC测定的其中单体成分含量作参照，对LC—MS中各大类成分百分比进行含量计算。结果：以此方 法计算的总黄酮、总生物碱、总香豆含量以及总合量与所用紫外分光光度法所测的含量基本一致。结 论 ：利用LC—MS对成分结构的归属来确定各大类成分的构成比例 ，以所测代表成分 HPLC含量结果 作参照来计算各大类成分的含量具有一定的可行性。 关键词：LC～MS 中药 总成分 质量标准 中药作为复杂体系 ，其 中有多种成分共 同协调 一 特定波长下测定并计算其含量 。尽管这一方法不 而起作用。中药 的多成分 、多靶 点的特点 已是其所不 尽人意 ：存在着专属性和易受其它成分干扰 的问题 ， 同于其它药物的关键之处。研究中我们发现，一个药 尤其是多个大类成分混合在一起时，更是如此 。但是 物 ，随着成分 的分离越来越细 ，其活性也随之 降低 ， 到 目前为止，仍没有较好的方法可以替代。以高效液 往往到最后单一成分时，其所表现 的活性反不如原 相色谱 (HPLC)方法 ，通过柱层析原理将各类成分分 来 的总成分 。因此 ，多数情况下 ，中药的活性组成单 离 ，并 由此可以清晰的累积各成分峰进而计算总成 元应该是 以总成分为主。这也是 中药所不同于其它 分含量 。但是这里存在一个重要的问题是每一个成 化学药物的重要之处。中药新药 的研发过程 中．对其 分峰的对照品如何获得 。由于洗脱时间的不同和各 有效部位 (各大类成分)的分离纯化以及其后的质量 成分紫外响应 的不 同，以某一对照品的对应峰面积 控制应为现代 中药的重点之一。 来计算不同成分峰的含量是不准确的 理论上讲 ． 总成分的测定常常以某一对照品为参照，在某 HPLC所分离的每一峰都应有一相应的对照品来对 应，这样所计算的含量才是准确的。但这种可行性较 收稿 日期：20O8—04～21 小。关键在于我们拿不到足够多的对照品，同时也没 修 回 日期 ：2O08一O4～3O 女 清华大学科技开发项 目(A2002162)：感冒药YL2000的研究，负责人 ：杜力军；博士学科点专项科研基金 (2Oo6Ooo3O72)：长期高剂量皮质酮对 海马神经原胞内能量平衡的影响及淫羊藿苷的调节作用，负责人 ：杜力军；“十一”五国家科技支撑计划(2006BA108B03—09)：中药复方质量控 制与评价方法研究，负责人：张启伟。 ★六 联系人：杜力军，本刊编委，教授 ，博士生导师，主要研究方向：药理学，E—mail：lijundu@mail．tsinghua．edu．Cgl。 [WorldScienceandTechnology~ModernizationofTrad)~ndChineseMedicineandMateriaMedica] 7 2008 第十卷 笼四期 Vo1．10No．4 有必要 。针对这一问题 ，有人 以总指纹图谱加上特定 目标质量 900，化合物稳定性 80％，离子肼驱动水平 成分含量来从定性定量两方面做总体质量控制f】】。由 60％。自动质谱／质谱参数 ：强度阈值 5000，母离子数 于紫外分光光度法 (uv)是在某一特定波长下对总成 2，分离宽度 2．0，碰撞能量 1．00，m／z100—1000。 分进行测试 ，不可避免会有一些成分 的非特异性干 4．对照品溶液的制备 扰 ，如果利用液相一质谱 (LC—MS)将各成分分离 ，并 精密取黄芩苷对照品5．3rag，盐酸小檗碱 4．5rag， 从结构上对其进行大类归属 ，再计算百分含量 ，这样