基于COⅠ基因的媒介蝇类快速分子鉴定研究.pdfVIP

中国媒介生物学及控制杂志2014 年10月第25 卷第5 期 Chin J Vector Biol Control, October 2014, Vol.25, No.5 ·427 · ·论 著· 基于CO Ⅰ基因的媒介蝇类快速分子鉴定研究 1 1 1 1 2 王颖 ，鲁闽 ，李金庆 ，刘明杰 ，岳巧云 1 烟台出入境检验检疫局技术中心，山东烟台264000 ；2 中山出入境检验检疫局 摘要：目的 为解决蝇类形态学鉴定的不足，建立基于细胞色素C 氧化酶亚基Ⅰ（CO Ⅰ）基因的DNA 条形码技术对蝇类进 行分子鉴定。方法 选取烟台口岸常见的16 只蝇类作为研究对象，形态学鉴定后，取蝇的单后足代表微量组织，提取总 DNA。依据资料，选取CO Ⅰ国际通用引物LCO1490 ：5′-GGT CAA CAA ATC ATA AAG ATA TTG G-3′，HCO2198 ： 5′-TAA ACT TCA GGG TGA CCA AAA AAT CA-3′，建立PCR 体系，完善PCR 程序，有效扩增蝇类的CO Ⅰ基因。纯化 PCR 产物后进行序列测定和比对。此外，应用Mega 5.05 软件分别用最大似然法、邻接法、最大简约法分析系统发育，构建 系统发育树比较进化关系。结果 16 只蝇类CO Ⅰ基因扩增片段长度为690 bp ，其中A ＋T 平均含量高达68.53% 。序列 比对结果及系统进化关系显示，16只蝇类CO Ⅰ基因的分子鉴定与形态学鉴定结果一致。结论 应用DNA 条形码技术可 成功扩增蝇类的CO Ⅰ基因，其分子鉴定与形态学鉴定结果完全一致，尤其适用于微量组织样本的鉴定。 关键词：DNA 条形码；细胞色素C 氧化酶亚基Ⅰ基因；蝇类；分类鉴定 中图分类号：R384.2 文献标志码：A 文章编号：1003-4692（2014 ）05-0427-05 DOI ：10.11853/j.issn.1003.4692.2014.05.011 StudyonrapidmolecularidentificationofvectorfliesbasedonCOⅠgene 1 1 1 1 2 WANG Ying , LU Min , LI Jin⁃qing , LIU Ming⁃jie , YUE Qiao⁃yun 1 Yantai Exit⁃Entry Inspection and Quarantine Bureau, Yantai 264000, Shandong Province, China; 2 Zhongshan Exit⁃Entry Inspection and Quarantine Bureau Supported by the National Key Technology Support Program of China （No. 2012BAK11B05）, Scientific Research Foudation of Administration of Quality Supervision, Inspection and Quarantine （No. 2012IK223）and Scientific Research Foudation of Shandong Entry⁃Exit Inspection and Quarantine Bureau （No. SK201116） A