血管内皮祖细胞用于构建血管新生的体外三维模型.pdfVIP

江苏医药 2009 年 11 月第 35 卷第 11 期 　J iangsu Med J ,November 2009 ,Vol 35 ,No . 11 ·13 11 · ·论著 · 血管内皮祖细胞用于构建血管新生 的体外三维模型 吕海涛 　韩莲花 　程 铖 　李红霞 　周亚锋 　杨向军 ( ) 【摘要】　目的　采用血管内皮祖细胞 EPCs 体外构建血管新生的三维模型 ,证实体外获得的 ( ) EPCs 参与血管新生 。方法 　 1 密度梯度离心法获取兔外周静脉血的单个核细胞 ,贴壁筛选法分离 EPCs ,于添加了 Singlequot es 的 EBM2 培养液中扩增 ,对培养 14 d 的细胞进行免疫荧光及免疫组织 化学鉴定 ; (2) 用上述同样的方法获取 EPCs ,并接种于 Mat rigel 三维基底膜胶 , Singlequot es 诱导 ,倒 ( ) 置相差显微镜观察血管形成 。结果 　 1 培养 7～9 d ,光电显微镜可见细胞集落形成 ,呈现干细胞特 ( ) ( ) 性 ;贴壁细胞表达血管性假血友病因子 vWF 、血管内皮生长因子受体 2 V E GFR2 和血管内皮钙 ( ) ( ) 黏蛋白 V Ecadherin ,呈现内皮细胞系特征 ;贴壁细胞用碳化青染料 D IL 标记的乙酰化低密度脂 ( ) ( ) 蛋白 D ILacL DL 及 FITC 标记的 I 型荆豆凝集素 F ITCU EA1 双荧光阳性 ,显现 EPCs 的生物学 特性 ; (2) 动态观察 :培养 2 周左右 ,在三维胶体中形成血管结构 。结论 　外周血来源的 EPCs ,经过 体外诱导后 ,具有成血管能力 ,可应用于制备体外血管新生的三维模型 。 【关键词】　　内皮祖细胞 ;血管新生 ;三维模型 【中图分类号】　R329 　　【文献标识码】　A 　　【文章编号】(2009) 1113 1103 Establishment of vascular neogenetic 3D model in vitro using rabbit endothelial progenitor cells 　L V Hait a o , HAN L i a n h u a , CH EN G Cheng , et al . Dep art ment of Car di ol ogy , Aff ili at ed Chil dren ′s Hosp it al , Sooch ow U niversity , Suzh ou 2 15003 , CHINA 【Abstract 】　Objective 　To st udy whet her va scular endot helial p rogenitor cell s could be obt ained f rom rabbit p erip heral bloo d and cult ured for va scular neo genetic t hreedimen sional ( 3D) mo del in vit ro . Methods 　The