流感病毒分离标准操作规程.docVIP

流感病毒分离标准操作规程(SOP)病毒分离分离病毒是诊断病毒性疾病最常用，并且高度敏感的方法之一。分离出的病毒须经免疫学、基因分析或电子显微镜等进一步鉴定确诊。病毒可长期保存，亦可用来作抗原性、基因特性或药物敏感性等分析。病毒分离亦受一定限制。目前用于分离病毒的组织细胞种类有限，每种细胞只能用来分离培养一或数种病毒。MDCK（狗肾细胞）是目前用于分离培养流感病毒最常用的细胞系。分离流感病毒最常用的活体是鸡胚，目前有些实验室用MDCK细胞代替鸡胚分离培养流感病毒。由于MDCK细胞属肿瘤细胞系，故用该细胞分离的病毒不能用于疫苗生产。各实验室应同时采用鸡胚和MDCK两种方法分离病毒，不应放弃用鸡胚分离病毒的方法。流感病毒细胞分离标准操作规程材料：1、细胞瓶或细胞管培养成片的MDCK细胞2、TPCK处理胰酶（牛胰腺来源XIII型）Sigma Cat. # T-86423、HEPES 缓冲液, 1 M 母液 GIBCO BRL Cat. # 15630-0234、D-MEM培养基，GIBCO BRL Cat. # 11965-0925、青、链霉素母液(10,000 U/ml 青霉素 G; 10,000 μg/ml 硫酸链霉素) ，GIBCO BRL Cat. # 15140-0236、牛血清白蛋白组分V, 7.5%溶液，GIBCO BRL Cat. # 15260-01