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红细胞检验的基本方法.ppt
红细胞检验的基本方法 1.来源 2.形态 3.功能 红细胞疾病 1.缺铁性贫血 IDA blood smear 本章 概况 1.有关铁指标、叶酸和维生素B12的检验。 2.红细胞膜缺陷、酶缺陷的检验。 3.血红蛋白异常的检验。 4.PNH的检验。 5.免疫性溶血的检验。 铁指标检验的几个概念 1.血清铁(serum iron )。 2.血清转铁蛋白(serum transferrin)。 3.血清铁蛋白(serum ferritin)。 4.血清总铁结合力(TIBC)。 5.转铁蛋白饱和度。 1.原理 1、原理: 3、临床评价: 1、原理: 1、原理: 小低贫的初步诊断 1.HGB(g/L) 男性120 女性110 2.HCT 0.35 男性0.40 女性 3.RBC (1012/L) 男性4.0 女性3.5 4.MCV(fl) 80 fl=10-15L 5.MCH (pg)27 pg=10 –12g 6.MCHC 0.32 血清铁指标检验的应用 小细胞低色素性贫血的鉴别 铁 总铁结合力 铁饱和度 铁蛋白 缺铁贫 减低 增高 减低 减低 ?地贫 正常 正常 正常 正/高 慢感贫 减低 正/低 减低 增高 铁粒贫 增高 减低 增高 增高 体积不同红细胞的形态 第二节 叶酸和维生素B12 的检验 一、血清和红细胞叶酸测定 1、原理: 1、原理: 1、原理: 1、原理: 第三节 溶血的检验 一、红细胞寿命测定 1、原理: 溶血的检验 1.血浆(plasma):血液中除去红细胞、白细胞、血小板的无形成分,含有除钙离子外其他所有凝血因子。 2.血清(serum):血液自然凝固后分离出来的淡黄色液体,缺少某些凝血因子(Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ因子)。 1、原理 1、原理 1.原理 1、原理: 第四节 红细胞膜缺陷的检验 一、红细胞渗透脆性试验 1.原理 1、原理: ①遗传性球形红细胞增多症自身溶血率增加,加入葡萄糖或ATP后明显纠正。 ②G-6-PD缺乏症等戊糖旁路代谢缺陷的病人自身溶血率增加,能被葡萄糖纠正。 ③丙酮酸激酶缺乏症时不能利用葡萄糖产生ATP ,其自身溶血率明显增加,加葡萄糖不能纠正,加ATP可纠正。 ④获得性溶血性贫血或自身免疫性溶血时试验结果常各有不同,对诊断意义不大。 ⑤本试验不够敏感和特异,仅对遗传性球形红细胞增多症有较大诊断价值. 1、原理: 1、原理 1、原理: 1、原理: 第五节 红细胞酶缺陷的检验 一、高铁血红蛋白还原试验 1、原理: 1、原理: 1、原理: 1、原理: 第六节 血红蛋白异常的检验 一、红细胞包涵体试验 1、原理: 1、原理: 2、参考值: 3、临床评价: 1、原理: 1、原理: 1、原理: 1、原理: 1、原理 1、原理: 1、原理: 1、原理: 第七节 PNH的检验 一、酸化血清溶血试验 1、原理: 1、原理: 第八节 免疫性溶血性贫血的检验 1、原理: 2、参考值: 谢谢! 二、自身溶血试验及其纠正试验 红细胞在37℃孵育48小时,其间由于膜异常 引起钠内流倾向明显增加,ATP消耗过多; 或糖酵解途径酶缺乏所引起ATP生成不足等 原因可导致溶血,称为自身溶血试验。在孵 育时,加入葡萄糖或ATP作为纠正物,观察 溶血可否有一定的纠正,称为纠正试验。 2、参考值: 正常人红细胞孵育48小时,不加纠正物的溶血 率<3.5%,加葡萄糖的溶血率<1.0%,加 ATP纠正物的溶血率<0.8%。 3、临床评价: 二、自身溶血试验及其纠正试验 三、红细胞膜三磷酸腺苷活性测定 Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和Mg2+-ATP 酶都是红细胞膜上的ATP酶。为测定酶的活性可分别测定酶作用于ATP的水解产物无机磷含量,若在基质中只加入Ca2+-Mg2+-ATP酶可测定Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性,若在基质中加入Na+、K+、Mg2+和ATP,测定的为Na+-K+-ATP酶和Mg2+-ATP酶的共同含量,再在基质中加入Na+-K+-ATP酶的抑制剂,测定结果仅为Mg2+-ATP酶活性,两者的差为Na+-K+-ATP酶活性。 2、参考值: 红细胞膜Na+-K+-ATP酶:(2.93±0.67)mU/109 红细胞Ca2+-Mg2+-ATP酶:0.4~2.5μmol/L-1·mg 膜蛋白·h-1 3、临床评价: 遗传性球形红细胞增多症:Na+-K+-ATP酶活性增加,Ca2+-Mg2+
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