天然水蛭素分离纯化中盐析条件研究.pdfVIP

『¨囊萎] 天然水蛭素分离纯化中盐析条件的研究 林晓洋，廖丹葵，童张法，雷爱祖 (广西大学化学化工学院，南宁530004) 摘要：本文用固体加入法研究了天然水蛭素的硫酸铵分级沉淀盐析过程。通过多次离心分段盐析和两次离 关键词：水蛭素#盐析；分离纯化；硫酸铵 中图分类号：Q516 文献标识码：D Conditionof ofNaturalHirudin salting-out Dankui，TONG Aizu Xiaoyang，LIAO Zhangfa，LEI ．LIN 530004，China) (CollegeofChemistryChemicalEngineeringGuangxiUniversity，Nanning courseof severaltimes and Abstract：The thenatnralhirudinwasstudied．Theresultsof salting-out centrifuge twotimes showedthattherewerelower of ofthe ofhim- centrifuge yieldprotein(Wp)，higheryield activity din(Wh)and hirudinatthe of saturation(Wa) higherpurifyingfold(Rhp)of range35％～45％(NH4)2S04 whichwasthesuitablefornaturalhirudin meanwhile。weconfirmthebestconditionof range sahing-out．And the in timeof is20min，here experimentOrthogonaldesign：40％(NH4)2S04，pH5．5，thedeposited Wp= 34．37％，Wh=69．33％，Rhp一2．02，Sp一5．33AT-U／mg． and ammoniumsulfate Keywords：hirudin!salting-out!separationpurification 引言 水蛭素是水蛭唾液腺分泌物中所含的一种蛋白质，天然水蛭素是从水蛭的唾液腺中分离 基酸组成[2]，无糖基化的单链小分子酸性单链多肽Es]。水蛭素是迄今世界上已发现的最强 的凝血酶特效抑制剂[4,5]，是一类很有前途的抗凝化瘀药物。其作用优于肝素，具有抗凝 血、溶解血栓，即中医所谓活血化瘀的作用，因此在处理诸如败血休克、动脉粥样硬化、脑 血管梗塞、心血管病、高血压、眼科以及缺少抗凝血酶Ⅲ的疾病方面显示出巨大的优越性和 广阔的应用前景E6,7]。 位的Tyr不能像天然产品那样被硫酸酯化从而严重影响了其生物学活性，因此分离纯化天 然水蛭素更具临床应用的价值，并且我国具有非常丰富的天然水蛭资源[1¨。 蛋白质的粗提纯在整个蛋白质分离纯化中占有很重要的位置，通过前期的粗提纯，如果 能得到活性回收率大，纯化倍数高，溶液比较澄清的蛋白质就为下一步的分离纯化提供了一 个良好的条件。蛋白质粗提纯上的分离纯化基本方法有盐析法、有机溶剂沉淀法和pH变性 通讯联系人：童张法．第一作者：林晓洋(1963一)，男，在读硕士． Correspondingauthor：Tongzhangfa．E-mail：Linxiaoyang@vip．163．corn