甾体激素对神经母细胞株SK-N-SH细胞摄取甘氨酸的快速作用.pdfVIP

生理学报 , 1999 年 12 月 , 51 (6) , 603～608 　603 　 Acta Physiologica Sinica 研 究 论 文 甾体激素对神经母细胞株 SK2N2SH 细胞 摄取甘氨酸的快速作用3 毕 　钢 3 3 　陈宜张 3 3 3 (第二军医大学神经科学研究所 , 上海 200433) 摘　要 　　本研究观察了 SK2N2SH 细胞摄取甘氨酸的一般情况 , 并进一步研究了甾体激素对 SK2N2SH 细胞摄取甘氨酸的快速作用。结果显示 : SK2N2SH 细胞高亲和力的甘氨酸摄取是 Na + 和 Cl - 依赖性的。皮质酮、孕酮和地塞米松对这种摄取有快速促进作用 , 雌二醇和脱氧皮质酮 无明显作用 , 表明甾体激素快速作用有特异性。皮质酮作用在 10- 9 ～10- 6 mol/ L 范围内呈浓度 依赖性。皮质酮快速作用不受蛋白质合成抑制剂影响。耦联牛血清白蛋白后 , 快速作用仍然存 在。但细胞外液无 Ca2 + 影响甾体激素快速作用。结果提示皮质酮、孕酮和地塞米松对 SK2N2SH 细胞摄取甘氨酸的快速作用是通过甾体激素非基因组机制作用完成的。 关键词 : 甾体激素; SK2N2SH 细胞 ; 甘氨酸 ; 非基因组机制 ; 摄取 学科分类号 : Q463 　　有资料报道甾体激素可以通过快速调节中枢神经递质摄取而影响其功能 , 但甾体激 素对甘氨酸摄取的快速作用尚未见报道 , 我们对此进行了研究。我们在突触体上初步观 察到皮质酮和孕酮对甘氨酸摄取有快速促进的非基因组作用[1 ] , 但突触体只是细胞的某 一部分 , 它并不能完全反映细胞生理情况下的功能活动。粗制突触体成分复杂 , 不但含有 突触体 , 还含有线粒体膜和胶质小泡等成分[2 ] 。另外不同功能的突触体混合在一起 , 难以 分清楚甾体激素对神经细胞与胶质细胞作用的差别。为了观察甾体激素对神经细胞的作 用 , 我们利用人神经母细胞瘤 SK2N2SH 细胞株进行了实验 , 因为迄今尚未见有关 SK2N2SH 细胞摄取甘氨酸的报道 , 我们首先观察了甘氨酸摄取的主要特征 , 并在此基础上进一步 探讨了甾体激素对 SK2N2SH 细胞摄取甘氨酸的快速作用及及其作用的可能机制。 1 　材料和方法 111 　细胞株 　　SK2N2SH 细胞株来源于人神经母细胞瘤 , 由中国科学院上海细胞生物研 　　1999201221 收稿　　1999203228 修回 3 ( ) 　　 国家自然科学基金资助项目 No 139330100 , 3 3 　　 现在地址 : 海军医学研究所二室 , 上海 200433 　　3 3 3 联系作者. Tel : E2mail : yzchen @public 1sta1net 1cn © 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 604 生 　　理 　　学 　　报 　　　　　　　　　　　　　　　51 卷 究所提供。 ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 112 　激素 　　皮质酮 CORT ; 孕酮 P ; 雌二醇 E ; 地塞米松 DEX Sigma 公司 , 以 2 上试剂均为水溶性。甾体激素溶液的配制 : 用 10 - 6 mol/ L 的甘氨酸液配成 10 - 7 mol/ L 。脱 ( ) ( ) - 2 - 6 氧皮质酮 DOC S