项目摘要 医疗卫生工业项目示例.docVIP

项目摘要 医疗卫生、工业项目示例 注意；一般医疗卫生项目不涉及性能指标，国家标准、行业标准除外。 主要技术内容：细胞MiRNAs的表达变化及其对相关靶基因的表达调控和DNA的甲基化改变参与机体组织细胞的生长发育、新陈代谢、衰老和凋亡及免疫-内分泌的调节。在肿瘤发生过程中miRNAs以及甲基化起到怎样的分子作用机制，目前的研究和报道较少，本项目就此问题进行了研究,主要研究结果及创新： 1. 采用miR-150 敲除小鼠动物模型，结合基因过表达、定点突变、荧光素酶报告载体和流式细胞仪分析技术检测miR-150在NKT细胞中的表达以及靶基因。结果提示miR-150通过靶定c-Myb 促进NKT细胞Th1型细胞因子分泌，增强其潜在的杀伤和清除肿瘤细胞的能力，抑制肿瘤细胞迁移； 2.miRNA微阵列技术、real-time PCR检测了肺癌组织和正常肺组织、胃腺癌组织和正常胃组织miRNAs的表达水平。结果提示miR-663在肺癌组织中高表达，miR-23a在胃腺癌中高表达； 3.利用MTT、软琼脂克隆、transwell侵袭实验、靶基因预测数据库预测结果，结合cDNA芯片结果，双荧光素酶报告基因实验检测差异表达的miRNAs和DNA甲基化对A549细胞、MGC803细胞增殖及侵袭转移能力的影响；结果提示miR-663通过靶基因TGFB1调控了A549细胞的增殖，miR-23a可能通过下调IL-6R的表达水平，导致细胞生长速度加快，转移能力增强； 4.甲基化特异的PCR，Western-blot和软琼脂克隆实验检测DNA甲基化对对抑癌基因P21表达、细胞衰老和细胞转化的影响。结果表明，DNA甲基化主要通过调控抑癌基因P21的表达，延缓了正常细胞的衰老进程，但同时也增加了正常细胞发生转化和癌变的几率； 5.采用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷处理和流式细胞仪分析表明，转录因子FoxP3编码基因去甲基化，增加机体CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）的比率和功能，产生免疫抑制效应促进肿瘤的发生和发展。 推广应用及效益情况：研究证实miR-150通过靶定c-Myb 促进NKT细胞Th1型细胞因子分泌，增强其潜在的杀伤和清除肿瘤细胞的能力，抑制肿瘤细胞迁移。miR-23a通过靶定IL-6促进了胃腺癌细胞MGC803增殖、侵袭转移能力； miR-663通过靶定TGFB1调控了肺癌细胞A549的增殖；DNA甲基化主要通过调控抑癌基因P21的表达，延缓了正常细胞的衰老进程，同时也增加了细胞发生转化和癌变的几率。共发表论文61篇， 其中SCI收录20篇，分别发表于J Immunol(IF=5.788)、J Mol Med (IF=4.688)、Antiviral Res(IF=4.301)、Journal of Cellular Biochemistry (IF=2.868)、Acta Biochim Biophys Sin (IF=1.953)等。在SCI数据库中引用82次。通过经办培训班，进行技术讲座等形式推广我们的研究成果，为恶性肿瘤患者的诊断和治疗提供新的治疗靶标，造福更多的患者。 推动科技进步的作用：研究成果为深入研究机体细胞MiRNAs的表达变化及其对相关靶基因的表达调控和DNA的甲基化改变与恶性肿瘤侵袭转移的关系，及其发挥作用的具体分子机制，提供了线索，并且为恶性肿瘤的诊断和治疗提供了新的治疗靶标。应用miRNAs抑制或补偿治疗也是目前抗肿瘤研究的一个新热点。两者结合为抗肿瘤药物研发、肿瘤治疗提供新的理论依据。 主要技术内容:股骨头坏死危害严重，可继发严重的髋关节功能障碍，探索股骨头坏死的病因病理至关重要，本研究对500余例股骨头坏死的病因、病理及影像学等多个角度进行了研究：1、从分子生物学（基因多态性）的层面对股骨头坏死病因进行研究，探讨股骨头坏死的病因；对股骨头坏死的诱因与骨坏死面积及坏死部位进行相应的病理分析；对股骨头坏死患者的血液指标进行检测，分析其与股骨头坏死的相关性。主要技术创新： 1、应用基因DNA测序的方法进行基因多态性检测，使检测结果更加准确。国内外首次报道酒精性骨坏死与亚甲基四氢叶酸脱氢酶基因（MTHFR）rs1801133位点基因变异具有相关性，发现T等位基因和TT基因型人群更易发生股骨头坏死，可对酒精性股骨头坏死进行早期预测、早期预防； 2、研究发现肝脂肪酶启动子区基因多态性与股骨头坏死无相关性、肝脂肪酶启动子区基因多态性与股骨头坏死无相关性，排除了因该区域基因变异致脂肪代谢异常而继发股骨头坏死的可能性； 3、研究证实激素性骨坏死激素用法用量与股骨头坏死面积及坏死部位无相关性，但是发现股骨头坏死面积与坏死部位具有相关性，小面积的坏死更易发生在