复合型液芯波导-毛细管电泳芯片上的发光二极管诱导荧光检测DNA片段地研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年lO月 V01．21No．3 JOURNALOFGUANGXINORMAI。UNIVERSITY 复合型液芯波导一毛细管电泳芯片上的发光二极管 诱导荧光检测DNA片段的研究 王世立，方肇伦 (东北大学分析科学研究中心，辽宁沈用110004) 是研究较为成功的领域，该方向的研究成果极大地促进了微流控分析系统的发展．在已报道的相关研究 中，由于使用大型的周边设备，尤其是1．IF检测系统，使整个分析系统难以达到微型化便携化的目标．本 文对简化微流控分析系统中的光学系统，减小全系统体积进行研究． 由Teflon AF涂覆的毛细管和含有微结构的玻璃芯片联接，形成复合型液芯波导毛细管电泳芯片，并在其上进行 I．ED IF对DNA片段进行检测，以实现全微流控系统的小型化和便携化． 系统的结构示意图见图1．玻璃芯片上使用十字形通道(通道宽80 pm，深209m)，通道的图1．复合 型液芯液芯波导一毛细管电泳芯片结构示意图三个端头固定有液池，分别作为样品、缓冲溶液和样品废液 图1 复合型液芯液芯波导一毛细管电泳芯片结构示意图 基金项目：教育部博士点基金资助项目(20011045016)；自然科学基金资助项目 作者简介：王世立(1970)，男，辽宁丹东人．讲师研究方向i微流控分析技术与毛细管电泳联用 广西师范大学学报(自然科学版) 第21卷 的贮存池．在余下的分离通道端头断面方向钻一个1mm深0．4mm直径的孔，使用平头钻头将孔顶修 i．d．，367 平o]．插入一根35cm长外壁TeflonAF涂覆的毛细管(76 pmO．d．)，并使用环氧树脂紧密 gm 固定形成复合型液芯波导一毛细管电泳芯片．该毛细管既作为分离通道，同时也是信号的传播通道，可将样 品产生的荧光沿毛细管轴线方向传导．LED激发点在距离毛细管出口端1cm处，一个绿色发光二极管 (548 nm)作为荧光激发光源，使用一根和毛细管轴线垂直的光纤(直径400pm)将激发光引导到激发点． 在毛细管的出口端，和毛细管同心紧贴放置一根和光电倍增管(PMT)相连的光纤(直径400pm)，它将毛 细管导出的光信号送至PMT检测．在光纤和PMT问有一片自制的600nm截止滤光片．复合芯片通道中 填充5％的线性聚丙烯酰胺，使用0．5XTBE作为缓冲溶液，EB(在0．5×TBE中浓度为3 mg／1，)作为荧 光染料．使用G3PDH(983bp)的RTPCR扩增产物作为模型样品检测系统性能，电泳谱图如图2，样品保 留时间380S，理论塔板为5．9×106． 06 05 04 03 02 01 ^u∞亡a1兰a。ca。seJor¨L 00 -01 0 200 400 11me／s G3PDH(983