猪链球菌耐药性与四环素耐药基因水平转移研究.pdfVIP

猪的传染病 1 材料方法 选择20 头品种一致，无用药背景的60 日龄健康育肥猪，随机分为A 、B 两组，每组10 头。A 组 实验猪每头每天拌湿料喂服 150mg AK，持续30 天，B 组实验猪不喂抗生素。采集喂药前 1 天，喂 药第1 天、3 天、5 天、10 天、20 天、30 天，停药后10 天、20 天、30 天的各组每头猪新鲜粪样。按 组将每个时间点采集的各猪粪样称取10g 混合混匀，稀释后涂板至伊红美蓝琼脂平板，每组每个时间 点选取5 株典型菌株，扩增16S rDNA 测序鉴定，ERIC-PCR 对其进行分型。参照CLSI （2012 ）推荐 的琼脂稀释法测定每株大肠杆菌对AK 的MIC 值。PCR 扩增aac （6’）、ant、aph、armA、npmA 、rmt B 、rmtC 、rmtD 、rmtD2 、rmtE 、rmtF 、rmtG 基因，基因序列来自Gene-Bank ，引物设计使用Primer 5.0 。 2 结果 每组每个时间点分离鉴定出 5 株大肠杆菌，ERIC-PCR 结果显示各组 50 株大肠杆菌彼此带型不 一。A 组MIC 测定结果显示喂药前1 天，喂药第1 天和停药后