仪器分析（ 第三版） 教学课件 作者 黄一石吴朝华杨小林 编 子模块2：紫外 可见分光光度法 任务4：分析测试条件的选择.pptVIP

尚辅网 尚辅网 能正确选择显色条件（显色剂的用量、酸度的控制） 能正确选择测量条件 （工作波长、参比溶液） 能正确分析测定过程可能产生的误差 尚辅网 任务4：分析测试条件的选择 紫外-可见分光光度法模块之 尚辅网 能力目标 尚辅网 问 题 针对水中微量铁的测定实验，如何选择工作波长，显色剂用量？ 实验中，需要通过尝试实验摸索最佳的显色条件和测量条件，取 得较高的灵敏度和准确度。 入射波长 显色剂用量 有色溶液稳定性 溶液酸度 主要条件包括有： 尚辅网 教师引导，学生设计方案 1、绘制光吸收曲线，确定工作波长 取两个50mL干净比色管；移取10.00μg mL-1铁标准溶液5.00mL于其中一个50mL容量瓶中，然后在两比色管中各加入1mL100 g L-1盐酸羟胺溶液，摇匀。放置2min后，各加入2ml1.5 g·L-1邻二氮菲溶液，5mL醋酸钠（1.0 mol.L-1）溶液，用蒸馏水稀至刻线摇匀。用2cm吸收池，以试剂空白为参比，在440～540nm间，每隔10nm测量一次吸光度。在峰值附近每间隔5nm测量一次。 尚辅网 教师引导，学生设计方案 2、显色剂用量的选择 取6只洁净的50mL容量瓶，各加入10.00μg·mL-1铁标准溶液5.00mL，1mL100g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀。分别加入0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL1.5 g·L-1邻二氮菲，5mL醋酸钠溶液，用蒸馏水稀至标线，摇匀。用2cm吸收池，以试剂空白溶液为参比溶液，在选定的波长下测定吸光度。 尚辅网 3、溶液酸度的选择 教师引导，学生设计方案 在6只洁净的50mL容量瓶中各加入10.00μg·mL-1铁标准溶液5.00mL，1mL100 g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀。再分别加入2mL1.5 g·L-1邻二氮菲溶液，摇匀。用吸量管分别加入1 mol·L-1NaOH溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。用精密pH试纸（或酸度计）测定各溶液的pH值后，用2cm吸收池，以试剂空白为参比溶液，在选定波长下，测定各溶液吸光度。 尚辅网 学生实施实验方案，学生绘制A-λ曲线、A-CR曲线和A-pH曲线 学生实训 归纳总结-分析测定条件选择方法 教师引导，学生归纳总结显色条件和测量条件选择的方法 测定过程中的注意事项： 显色过程中，每加入一种试剂均要摇匀。 改变波长时应重新校正透射比为100％。 保持仪器的测定条件一致。 尚辅网 显色剂用量 显色剂用量确定方法 配制一系列被测元素浓度相同不同显色剂用量的溶液，分别测其吸 光度，作A-CR曲线，找出曲线平台部分，选择一合适用量即可。 吸光度与显色剂浓度的关系曲线 尚辅网 溶液酸度 溶液酸度确定方法 选择合适的酸度，可以在不同pH值缓冲溶液中，加入等量的被测 离子和显色剂，测其吸光度，作A-pH曲线，由曲线上选择合适的 pH范围。 吸光度A与pH关系曲线 尚辅网 稳定性、干扰消除 绘制A对t的曲线，选择吸光度平坦的部分确定最佳的显色时间。 干扰的消除 稳定性实验 改变酸度、氧化剂、掩蔽剂消除； 改变入射波长； 改变合适的参比溶液。 尚辅网 显色温度、溶剂选择 大多数显色反应是在常温下进行的，有些反应必须在较高温度下。 绘制工作曲线和进行样品测定时应该使溶液温度保持一致。 显色温度 溶 剂 有机溶剂常常可以降低有色物质的离解度，增加有色物质的溶解， 从而提高了测定的灵敏度