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尚辅网 尚辅网 仪器分析教程 10.1 概述 10.1 概述 10.1 概述 10.1 概述 10.1 概述 10.1 概述 10.1 概述 上一内容 下一内容 回主目录 返回 * 尚辅网 第10章 高效液相色谱法 10.1 概述 High Performance Liquid Chromatography (HPLC) 10.1.1 HPLC的特点 10.1.2 HPLC与GC的比较 尚辅网 高压 高速 高效 高灵敏度 应用范围广 10.1.1 HPLC的特点 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效 分离分析方法。 尚辅网 10.1.2 HPLC与GC的比较 1.相同点 ①液相色谱所用基本概念:保留值、塔板数、塔板高度 分离度、选择性等与气相色谱一致。 ②液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气 相色谱基本一致。 尚辅网 10.1.2 HPLC与GC的比较 2.不同点 由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中的气体作 为流动相,而液体和气体的性质不相同;此外,液相色 谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同,所 以,液相色谱与气相色谱有一定差别,主要有以下几方 面: 尚辅网 10.1.2 HPLC与GC的比较 2.不同点 ① 流动相 HPLC:液体(载液),会与样品发生相互作用; GC:气体(载气),与样品呈惰性。 ② 固定相 HPLC:种类较少,仅十几种,分离选择性在很大程度上 要通过选用不同的流动相来改变。 GC:种类较多,数百种,分离选择性主要通过选用不同的 固定相来改变。 尚辅网 10.1.2 HPLC与GC的比较 2.不同点 ③分析对象 HPLC:受样品挥发度和热稳定性的限制,非常适合分子量较大、难气化、不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物及高聚物的分离分析,大约占有机物的70~80%。 GC:能分析在操作温度下能气化而不分解的物质。对高沸点化合物、非挥发性物质、热不稳定化合物、离子型化合物及高聚物的分离、分析较为困难。致使其应用受到一定程度的限制,据统计只有大约20%的有机物能用气相色谱分析; 尚辅网 10.1.2 HPLC与GC的比较 2.不同点 ④ 分离温度 HPLC:通常在室温下操作,较低的温度,一般有利于色谱分离条件的选择 GC:一般在高于室温下分离,最高可达300~400℃左右。 ⑤色谱柱 HPLC: 柱较短较细 GC :柱较长较粗 尚辅网 10.1.2 HPLC与GC的比较 2.不同点 ⑥ 流动相驱动力 HPLC:采用高压泵 GC :高压载气。 3.优点与不足 液相色谱中制备样品简单,回收样品也比较容易,而且回收是定量的,适合于大量制备。但液相色谱尚缺乏通用的检测器,仪器比较复杂,价格昂贵。在实际应用中,这两种色谱技术是互相补充的。 尚辅网 * *
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