仪器分析教程 教学课件 作者 陈集朱鹏飞 主编 第10章 高效液相色谱法－仪分教程 10.2 高效液相色谱仪.pptVIP

尚辅网 尚辅网 仪器分析教程 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 10.2 高效液相色谱仪 上一内容 下一内容 回主目录 返回 * 尚辅网 第10章 高效液相色谱法 10.2 概述 High Performance Liquid Chromatography （HPLC) 10.2.1 高压输液系统 10.2.2 进样系统 10.2.3 分离系统 10.2.4 检测系统 尚辅网 液相色谱仪器 尚辅网 液相色谱仪器 尚辅网 液相色谱仪器 尚辅网 液相色谱仪器 尚辅网 尚辅网 高效液相色谱仪主要由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测和记录系统四大部分组成。 HPLC流程示意图 尚辅网 10.2.1 高压输液泵 HPLC主要部件之一，为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 高压输液泵主要由贮液器、高压泵、过滤器、梯度洗脱装置等组成。 尚辅网 10.2.1 高压输液泵 （1）贮液器 一般由玻璃、不锈钢或聚四氟乙烯制成，容量为1～2L。 贮液器应带有脱气装置。 尚辅网 10.2.1 高压输液泵 （2）高压泵 一般要求泵的输出压力高达15～50Mpa。 ①恒压泵：输出的压力恒定，而流量则随色谱系统阻力的变化而变化，不适于梯度洗脱， ②恒流泵：在一定的操作条件下，输出的流量恒定，柱阻力或流动相黏度改变只引起柱前压力的变化，特别适合梯度洗脱。 尚辅网 外梯度: 利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。 内梯度: 一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。 10.2.1 高压输液泵 （3）梯度洗脱装置 尚辅网 10.2.1 高压输液泵 梯度洗脱装置示意图 尚辅网 10.2.2 进样系统 （1）注射器进样 尚辅网 10.2.2 进样系统 流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置， 其结构如图所示： （2）六通阀进样 尚辅网 10.2.2 进样系统 （3）自动进样器 可自动进样、适合大量 样品的分析、实现自动 化。 尚辅网 10.2.3 分离系统 柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 尚辅网 10.2.4 检测系统 1.紫外检测器 原理：基于待测组分对特定波长紫外光的选择性吸收，组分浓度与吸光度的关系服从比耳定律。 特点：灵敏度高；线形范围高； 流通池很小（容积 8μL）； 对流动相的流速和温度变化不敏 感；波长可选，易于操作；可用 于梯度洗脱。应用最广，对大部 分有机化合物有响应。 尚辅网 紫外检测器的重要进展： 光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。 尚辅网 10.2.4 检测系统 2.荧光检测器 高灵敏度、高选择性； 对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应； 尚辅网 10.2.4 检测系统 3.电导检测器 原理：基于被测组分的导电能力的不同，它对温度和载液流速较敏感，是离子交换色谱中使用最广泛的检测器。 尚辅网 10.2.4 检测系统 4.示差折光检测器 原理：基于被测组分和流动相的折光率的不同， 特点：该检测器为通用型检测器（每种物质具有不同的折光指数） ，是除紫外检测器之外应用最多的检测器。其灵敏度低、对温度敏感、不能用于梯度洗脱 类型：偏转式、反射式和干涉型三种。 * *