369份淡、海水鱼香港海鸥型菌污染状况研究.pdfVIP

3 讨论 单纯疱疹病毒（HSV ）分为Ⅰ型（HSV-1 ）和Ⅱ型（HSV-2 ）两个血清型，无论是发展中国家还 是发达国家，HSV 自然感染率都相当高。目前没有能够控制HSV 的特效药，因此研制有效疫苗是 控制HSV 感染的关键。由于HSV 能形成潜伏感染和具有致癌潜能，几乎排除了采用传统灭活或减 毒法制备HSV 疫苗的可能性，因此多肽疫苗和DNA 疫苗的研制成为热点。其中DNA 疫苗具有多 肽疫苗的安全性和减毒活疫苗诱导全面免疫应答的高效性，备受青睐。 目前，用于DNA 疫苗构建的质粒通常是氨苄青霉素（Amp ）抗性，Amp 为广谱抗生素，如果 终产品中有残留 Amp ，可能会对青霉素过敏的接种者不安全，而卡那霉素（Kan ）等氨基糖苷类抗 生素很少在人体中产生过敏反应。本研究通过对Amp 抗性真核表达质粒载体pcDNA3 的重组改编， 成功构建了含Kan 抗性的新型真核表达质粒载体pcDNAkan ，为HSV-2 DNA 疫苗的后续研究提供了 合适的载体。 目前已发现的HSV 病毒上，有 12 种不同的表面包膜糖蛋白，即gB、gC、gD、gE、gG、gH、 gI、gJ、gK、gL、gM、gN 。其中以gD 最为重要，它是HSV 主要的免疫原，能诱导细胞免疫和体 液免疫，产生高滴度的中和抗体，激发DTH 反应及T 细胞增值反应，而且HSV-1 和 HSV-2 的gD 蛋白有80%的同源性，他们之间有交叉免疫反应。本研究选用gD 作为目的基因，以pcDNAkan 为 载体，成功构建了含有HSV-2 gD 全基因序列的新型DNA 疫苗pgD 。pgD 能够诱导小鼠产生较好的 体液免疫反应，并且在致死性攻毒实验中100%的保护率，显示出pgD 作为一种有效的HSV-2 DNA 疫苗的巨大潜力。 因为HSV 的感染特点是潜伏性和复发性的，并且有研究表明体液免疫反应在防止病毒全身扩散 和控制病毒上能起到一定作用，但是并不能消除潜在的病毒。因此能否诱导高效的细胞免疫反应， 消除潜在的病毒，成为疫苗能否有效治疗 HSV 复发的关键。在接下来的研究中，我们将围绕 pgD 进行进一步的探索，研究其诱导小鼠产生细胞免疫反应的能力和水平，并评价其作为治疗性疫苗的 有效性。 369 份淡、海水鱼香港海鸥型菌污染状况研究 1 2 1 1 1 1 1 1 梅玲玲 高雯洁 朱 敏 潘军航 张俊彦 汪 炜 姜德霞 张严峻 1 浙江省疾病预防控制中心（310009） 2 嘉兴市疾病预防控制中心（314000） 【摘要】 目的：掌握浙江省海、淡水鱼中香港海鸥型菌污染状况，为防止食源性香港海鸥型菌 病的发生和流行提供科学依据；方法：用改良头孢哌酮麦康凯琼脂分离、API 20NE 鉴定香港海鸥型 菌。K-B 纸片扩散法作耐药性测定。通用引物扩增16S rDNA 并与香港海鸥型菌HKU1 株开展同源 115 性比较。结果：369 份样品检出香港海鸥型菌 18 株，阳性率为4.88% ，其中，鲤鱼检出率为25.00% ， 草鱼的阳性率为10.26%，海水鱼以及鲫鱼、鲢鱼、扁鱼等淡水鱼未分离到本菌；分离的香港海鸥型 菌16S rDNA 序列与HKU1 株仅相差 1～2 个碱基，同源性在99.6%～100.0%之间；18 株菌对头孢拉 定、万古霉素、甲硝唑、克林霉素、头孢哌酮完全耐药，对红霉素、亚胺培南、克拉霉素、氨曲南、 庆大霉素、丁胺卡那霉素、三甲氧苄氨嘧啶、四环素、氯霉素、多粘菌素 B 、环丙沙星完全敏感， 对头孢噻吩、胺苄西林、头孢曲松的耐药性分别为83.33%、61.11%和5.56%。结论：浙江省存在香 港海鸥型菌污染源，建议相关监督部门应加大这类产品的管理力度，防止香港海鸥型菌病在我省的 发生和传播。 【关键词】 香港海鸥型菌，污染状况，耐药性，16S rDNA Investigation on Laribacter hongkongensis Contamination of 369 sampl