不同炮制工艺制首乌HPLC化学图谱变化及对大鼠血虚模型的作用研究.pdfVIP

不同炮制工艺制首乌I-IPLC化学图谱变化 及对大鼠血虚模型的作用研究 丘小惠1孙景波1 闵江2巫志峰1欧润妹1 (1广州中医药大学第二临床医学院 广东广州510120 2广东康美药业股份有限公司 广东普宁515300) 【摘要】 目的：以药效方法筛选何首乌炮制工艺。方法：建立大鼠血虚动物模型，比较生首乌和不同炮制工艺制首乌 粗多糖和醇提液、清蒸和黑豆汁拌蒸制首乌醇提液的药效差异。结果：生首乌和制首乌多糖均有补血功效。生首乌醇提 部位无补血功效；不同炮制工艺制首乌醇提部位补血功效有差异。黑豆汁具有增强何首乌补血功效的作用，但与炮制工 艺有关。结论：炮制工艺直接影响制首乌补血功效。 关键词：何首乌炮制HPLC血虚 何首乌和制何首乌为临床常用中药饮片。近几年对何首乌炮制前后化学成分变化的研究，主要着重 于羟基葸醌类化合物和均二苯烯类化合物、磷脂成分的变化【l一。但就目前研究结果来看，有关何首乌炮 制研究中作为衡量炮制程度的葸醌类成分的变化与炮制后药效变化并无直接相关性；传统经验对首乌的 炮制时间有一定的要求，而被认为是具有保护脑组织作用的二苯乙烯苷和磷脂类成分指标，为热不稳定 成分，随炮制时间和温度的升高而降低。由此可见，由于何首乌炮制前后与药效相关的化学成分尚不完 全明确，尚未能阐明何首乌传统炮制的科学内涵，制约了何首乌炮制工艺和质量标准的科学规范化。 历代医家认为，何首乌生品与制品功效不同，经炮制后具有补肝肾，益精血，乌须发等功效。清代 o】论述“首乌I·IIll专入肝经以为益血祛风之用，其兼补肾者，亦因补肝而兼 黄宫绣篡的《本草求真》[1 及也。……系调补后天营血之需，以为常服，长养精神，却病调元之饵”。认为何首乌通过养血益肝兼 及补肾作用。而祖国医学“肾藏精，主骨生髓”、“生精化血”、“精血同源”的理论，也说明肾精与 血液的生成密切相关。因此，补血功效是何首乌的主要功效之一。 本研究比较了不同炮制工艺制首乌的ttPLC化学图谱变化，并选用骨髓抑制剂环磷酰胺和可致红细 胞膜损伤造成溶血的乙酰苯肼并用致大鼠血虚模型，比较不同何首乌炮制工艺的药效差异，探讨制首乌 炮制工艺一化学图谱一药效的相关性。 1 HPLC化学图谱变化 1．1仪器与试药 1．1．1 仪器和试剂 二元梯度泵、 柱温箱、DAD紫外检测器；甲醇、磷酸为分析纯，乙腈为色谱纯，水为超纯水。 1．1．2供试样品 何首乌药材及制首乌饮片由广东康美饮片厂提供，原药材经该厂质检部鉴定为广东德庆产蓼科植 multiflomm 物何首乌(PolygonumThunb)的根块，其质量符合2005版《中国药典》(一部)何首乌项下 规定。 制首乌制备：取润制后的何首乌片置竹制或木制笼屉蒸具内采用传统方法蒸制8小时，停止加热， 或晒干。 1．1．3供试品溶液的制备 u 渣用甲醇溶解并定容至lOml。过0．45m微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。 [基金项目】国家“十五”重大科技专项子项目(2001BA701A55—21) [通讯作者】丘小惠，副主任药师，，硕士生导师．Tel：02037403 Email：g。xhqxh@medmail．com．cn 1．1．4HPLC图谱比较 u 色谱条件：Phenomenx—C18(5 图1．何首乌生品液相指纹图谱 (其中4号峰为二苯乙烯苷：10号峰为大黄素，11号峰为大黄素甲醚) 图2． 笼屉蒸24h制首乌液相指纹图谱 DA mA‘ 25盯 20盯 ～ 15旺 10a=