611.阳离子油复合鞣制方法处理人工生物瓣膜生物材料的研究.pdfVIP

全国心脏瓣膜外科学术会议论文集2005年4月 ·87· 的异种瓣膜鞣制后，瓣膜退化和细胞浸润可以明显减轻。 将去细胞处理的牛心包经戊二醛鞣制，再用2，3一丁二醇改性处理，从理论上讲更接近理想的生 物瓣膜材料。本实验将去细胞处理和未去细胞的牛心包分别用2，3一丁二醇作改性处理，与戊二醛牛 心包比较其抗钙化效果，发现2，3一丁二醇改性处理可明显减轻钙化，其机理可能是2，3一丁二醇的 两个羟基受两侧紧邻的两个碳键的影响，结构相对不稳定，容易与醛基内聚结合，形成稳定的环状缩 醛，阻止了游离醛基的细胞毒性作用，达到良好的抗钙化效果。组织钙化与其死亡的细胞及细胞膜有 关，组织钙化前就已经失活，钙化发生在组织失活的无细胞区(由植入物中渗出的局部毒性物质导致的 死亡细胞及细胞膜的残体所致)。钙质沉着也见于瓣膜表面血栓内。 去细胞处理的牛心包较未去细胞处理的牛心包抗钙化效果更佳，二者有显著性差异(PO．001)， 究其原因可能是去细胞处理消除了牛心包上的细胞成分，从而去除了早期钙盐沉积的中心。在动物皮下 移植模型中，生物瓣材料植入48hr内，即有形态和化学上的钙化改变，钙盐沉积首先发生在移植物的 结缔组织细胞。本实验组织学观察示戊二醛组心包胶原纤维严重玻变，纤维断裂，大片钙化；2，3一丁 二醇处理组心包胶原纤维轻度溶解玻变，炎性细胞浸润少；去细胞组心包胶原变性，及炎性细胞浸润均 较前两组轻。VonKossa染色见戊二醛组牛心包片中有大片染成黑色的钙化灶，钙化组织有碎裂；2，3 一丁二醇组牛心包片仅有少许散在的灶性钙化，而去细胞组牛心包片无明显钙化灶。电镜观察可见戊二 醛牛心包的细胞成分及其周围钙化严重。生物瓣的钙化通常首先发生在细胞核内，细胞器和细胞膜的框 架上，然后再扩展到细胞外的结缔组织，特别是胶原纤维。活体动物细胞膜内钙离子的浓度约为10一， M，而细胞外为10。3M，在细胞膜两侧有1000倍的级差，这种浓度梯度是通过细胞膜上耗能的钙泵来维 持的，当外部因素作用于细胞导致细胞损伤时，细胞膜被破坏，通透性增加，且没有足够的高能磷酸 (特别是ATe)支持细胞膜将钙离子泵出细胞，导致细胞内钙聚集而产生钙化，牛心包鞣制后成为惰性 组织，其组织细胞也失活，当这种牛心包制成的瓣膜被植入人体后，人体内的钙被动地大量涌入失活的 细胞内，与细胞碎片或膜性细胞器线粒体等磷脂结合，导致羟基磷灰石晶核形成，成为初始钙化源。它 进一步聚集生长，使钙化逐渐扩大。生物瓣的钙化多以磷酸钙的形式沉积，磷也与生物瓣钙化有密切关 系。细胞膜上的磷脂是磷钙结晶的部位，生物瓣的钙化99％始发于此。去细胞处理去除了全部细胞和 脂膜，包括磷脂成分，起到抗钙化作用。钙质沉着最早发生在小血管内皮细胞周围。对牛心包来说，毛 细血管区的细胞成分最不易去除干净，因此找到一种去细胞彻底的方法是十分必要的。 2，3一丁二醇组和去细胞组之间抗拉强度和热皱缩温度无显著差异(P0．05)，但与新鲜牛心包组 比较都有显著差异(P0．001)，表明戊二醛鞣制后改性处理可显著提高牛心包的稳定性和机械强度， 去细胞处理没有影响戊二醛与胶原蛋白的交联作用，仍保持其机械特性好的优点。 611．阳离子油复合鞣制方法处理人工生物瓣膜生物材料的研霁 王 山东省千佛山医院心脏外科(济南250014)东 王春祥王雪梅许莉 山东大学齐鲁医院心脏外科吴树明 摘要 目的本研究对牛心包瓣膜生物材料单纯戊二醛鞣制与阳离子油复合鞣制方法进行了对比，从分子水平上对 生物材料鞣制方法的机制迸行了研究。方法对牛心包生物材料进行组织学、超微结构和机械抗张强度测试。对比阳离 子油复合鞣制牛心包和单纯戊二醛鞣制牛心包的组织钙含量。用傅立叶红外光谱仪测定羧基含量。牛心包生物瓣膜经体 外模拟疲劳实验台加速检测。结果阳离子油复合鞣制牛心包瓣10年后扫描电镜观察，组织胶原纤维结构排列致密、 整齐，细胞结构完整、牢固，钙化不明显。阳离子油复合鞣制组牛心包钙含量(2．87±0．32)veVmg，单纯戊二醛组牛心 · ·88 全国心脏瓣膜外科学术会议论文集2005年4月 鞣制组，gr#t,光谱图显示羧基(COOH—1)峰明显降低，而单纯戊二醛鞣制组仍含有相当多的羧基。体外模拟加速疲劳 实验台测试，牛心包瓣膜为3．8亿次，从受力疲劳方面能经受住大