双链DNA和生物碱类化合物非共价作用的电喷雾质谱研究.pdfVIP

第24卷增刊 分析测试学报 VuI24 1竺!兰!! 坚!塑!塑坐!!!!!!!兰!!型』!!：!竺!竺!!!!!!；里!!竺：型 双链DNA与生物碱类化合物非共价 作用的电喷雾质谱研究 宋凤瑞，刘志强，刘淑莹4 (巾国科学院K春应用化学研究所新药研究实验窀，长春质谱中心，吉林长春130022) 据文献报道，l临床上使用的很多抗癌药物都是以DNA为主要的作用靶点，通过与癌细胞的 DNA发生相互作用破坏其结构，进而影响基因调控与表达的功能，表现出抗癌活性…。而随着中药 抗恶性肿瘤研究的不断深入，其作用机理及活性筛选的方法学研究也倍受关注。本文利用电喷雾质 谱技术，以双链DNA为靶分子，通过对其与小檗碱类生物碱成分徘共价复合作用的研究，探讨生 物质谱方法作为药物筛选方法的可行性。 1 实验部分 1．1材料 所有的寡聚脱氧核苷酸有大连宝生物股份有限公司合成。分别为：12-mer的d 643．7 645．6 (GCGATATATCGC)(M，=3U)(1)和d(GCGCGATCGCGC)(M，=3u)(2)；6-mer的d 790．4 791，3 (ATGCAT)(M，=1U)(3)，d(GCATGC)(M，=1U)(4)。生物碱化台物分别为小檗碱 (M，=336)，巴马汀(魍=352)，药根碱(M，=338)。 1．2仪器条件 kV，加热毛细 所有实验均在FinniganLCQ离子阱质谱仪上完成，电喷雾电离源，喷雾电压2．5 管温度140oC，壳气60arb，辅助气10orb；毛细管电压一35V，管透镜电压一5V。流动注入泵的 流速为5tzlMmin。 2结果与讨论 在实验中选择双链DNA的奇数电荷态的离子作为研究对象。该离子对于12-met的双链DNA， 为[ds。]“(m／z1456．5)和[ds2]5一(1 193．2) 和[ds。]3。(1 的双链DNA。 min进 双链DNA分别与小檗碱、巴马汀、药根碱以1：1，1：2的摩尔比混合后，放置60一90 学计量比1：l的复合物离子外，还生成了化学计量比1：2的复合物离子，复合物离子丰度较高。 图1a、b分别为药根碱与12．me]F的ds。，ds：作用的电喷雾质谱图。 赫 呜 帆+ygJ]。dB?…． “ds?一Orss?一 dl…5I B ‰+2y“、52S2 1 9066 fd。，+y目r ／ 、 1严1r ”阵。屺。h l。q【105．188 m一．11戳妊』n 600 800 柏0 6肿 800 1000l 2001400l 1 2000 m，= 图I 巴马汀与双链DNA的电喷雾质谱图 A 12-met的dsl；B12Ⅲ的d82