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V01．30
第30卷专辑 南昌大学学报(理科版) Suppl
2006年9月 JournalofNanchang Science)
University(Natural Sept．2006
文章编号：1006—0464(2006)专辑一1059—02
新型荧光探针苯并菲罗啉酮的合成
及其与蛋白质的相互作用研究
郭隆华，邱彬
(福州大学化学系，食品安全分析与检测技术教育部重点实验室，福建福州 350002)
—BPO的荧光有明显的淬灭作用，且当BSA在浓度为0．05 ms／L范围内有良好的线性关系，检测限为6
ms／L一0．4
斗g／L，由此建立了一种测定蛋白质的新方法。同时对其荧光淬灭机理进行了初步探讨。计算了表观结合常数、结合
位点数，并根据热力学参数确定了BSA与m—BPO之间的主要作用力类型。
关键词：荧光探针；苯并菲罗啉酮；荧光淬灭；BSA
中圈分类号：0657 文献标识码：A
蛋白质(protein)是生物最重要的基本组成成分
1 实验部份
之一，与营养、免疫、新陈代谢、生命的起源和进化等
都息息相关。由于蛋白质在体液中的含量可作为人 1．1仪器与试剂
体营养健康、疾病诊断的重要指标，因此蛋白质的定 Eclipse一荧光光谱仪(美国VARIAN)
量测定在生命科学、临床医学和化学研究中占有十 1．2实验方法
分重要的地位。目前蛋白质含量的测定方法有很 1．2．1 2一甲基苯并一1，10一菲罗啉一7(12H)一
多，如凯氏定氮法、考马斯亮蓝法、浊度法¨1等。这 酮(m二-BPO)的合成(Fig．1)
些方法都存在一定的局限性，例如浊度法准确度和
精密度较低，凯氏定氮法操作步骤的繁琐以及考马
斯亮蓝法抗干扰能力较差等等。近年来发展起来的
稀土离子探针作用强，灵敏度高，但该法所需的标记
试剂较为昂贵。因此寻找新的、试剂费用低、所用仪
器简单、分析灵敏度高的荧光衍生化试剂无疑具有
● u13
重要的科学意义。
of
Fig．1Synthesis
本文发现自行合成的2一甲基苯并一l，10一菲
phenanthrolin一7(12H)一one．
罗啉一7(12H)一酮(m—BPO)作为荧光探针可与
取8一氨基喹哪啶0．474g，邻溴苯甲酸0．603
牛血清白蛋白相互作用，在pH7．4的Tris—HCI缓
g，无水碳酸钾0．207
g，铜粉0．015g，一并放入一个
冲溶液中，BSA的加入对111一BPO的荧光有淬灭产
10
mL磨口烧瓶中，再加入2mLDMF，在油浴中加热
生，且荧光淬灭变化值与蛋白质浓度在0．05—0．4
mL1 moL／LHCl
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