多重RT-PCR快速检测鉴别H5、H7与H9亚型AIV方法的建立.pdfVIP

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会论文集 多重RT—PCR快速检测鉴别 H5、H7和H9亚型AIV方法的建立 谢芝勋，庞耀珊，刘加波，邓显文，唐小飞 (广西兽医研究所广西南宁530001) 摘要：参考AIV M基因和HA基因序列，设计了四对引物，其中一对为针对不同HA亚型AIV的通用引物，另外为 三对分别针对H5、H7和H9亚型AIV的特异性弓|物。这些引物所扩增的cDNA片段大小分别为244 bp、860bp、634bp 和488 多重RT-PCR技术。特异性和敏感性试验结果表明，该技术可以同时对AIVM基因和H5、H7、H9亚型AIVHA基因进 行扩增，分别得到244 bp、860bp、634bp和488bp四条cDNA扩增片断，对其它常见禽病病原无特异性扩增，结果为阴 性；该多重RT—PCR对A1VRNA的最低检出薰为10pg，对H5、H7和H9难型AIVRNA的最低检出量均为