应用FQ-PCR法对347例HPV+DNA组合分型检测的临床意义探讨.pdfVIP

第五届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛 [6] 刁琳琪，王春香，康借，等.河南省乙型病毒性肝炎 [7] 黄湘婉.乙肝“大三阳” 、“小三阳”与血清病毒含量之 血清流行病学调查. 中国计划免疫，2007 ，13 ： 间相关性分析.中国医药导报，2008 ，5：192-192. 328-334. 应用 FQ-PCR 法对 347 例 HPV DNA 组合分型 检测的临床意义探讨 刘立明 马洪斌 李永利 王雪飞 郭晓东 刘树红 赵雨来 王海滨 毛远丽 作者单位：100039 解放军第三○二医院临床检验医学中心分子诊断室（刘立明、马洪斌、李永利、王雪飞、王海滨、 毛远丽），院病理科（郭晓东、刘树红、赵雨来） 通信作者：王海滨，电子信箱：hbnwang@ 宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一，在全球范 材料与方法 围内，每年约有 20 多万女性死于宫颈癌。在发 一、材料 展中国家，宫颈癌的发病死亡率仅次于乳腺癌 2010 年 10 月至 2012 年 2 月解放军第三○ [1] 。人乳头瘤病毒（Human Papilloma Viruse ， 二医院妇科及体检中心门诊就诊的患者 347 例， HPV ）持续感染存在是宫颈癌致病的首要因素， 年龄为 22～77（44 ）岁，对所有样本采用FQ-PCR 其可诱发宫颈鳞状上皮内瘤变（ cervical 法进行HPV 分型检测和TCT 液基超薄细胞学检 intraepithelial neoplasia，CIN ），文献报道，90% 测。患者临床表现为宫颈炎症或非经期阴道异常 以上CIN 有 HPV 感染[2] 。随着分子生物学技术 出血等，部分为无症状查体妇女。 的发展，目前已分出 100 余种 HPV 亚型，其中 二、方法 40 余种与宫颈感染和病变有关。早期检测 HPV 1．液基细胞采集：由妇产科医生以窥阴器 型别而及时采取措施，可以有效控制 CIN 的发 暴露宫颈，擦净宫颈口分泌物，用特制的宫颈刷 生，降低宫颈癌的发生几率。目前 HPV DNA 精 收集宫颈口及颈管的脱落上皮细胞，并将毛刷头 细分型的文献报道较多[3～5] ，但对于 HPV 组合 部置入细胞保存液中。期间取两份标本分别立即 分型的报道较少。本文拟对我院采用 FQ-PCR 组 送分子诊断室和病理科，-20℃保存，用于 HPV 合分型方法检测 HPV DNA 型别的患者做回顾 DNA 分型检测和 TCT 液基超薄细胞学检测。 性统计分析，比较不同年龄组 HPV DNA 型别 2 ．HPV 分型检测：实时荧光定量 PCR 组合阳性率及不同组合型别 HPV DNA 的分 （FQ-PCR ）方法的人乳头瘤病毒核酸检测试剂 布，并通过 TCT 液基超薄细胞学检测指标探讨 盒购自中山大学达安基因股份有限公司。按照试 HPV 型别与临床症状的联系，以期评价开展 剂盒提供的操作流程提取患者宫颈脱落细胞 HPV DNA 组合分型初筛检测的临床价值。 DNA ，然后每份样本分别构建 3 个 PCR 体系，3 个体系的通用引物分别为：低危—HPV6 ，11 型； 常见高危—HPV16 ，18 型；高危 HR （8 ）型 — 211 — 第五届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛 —HPV16 ，18，31，33，45 ，52，56，58 。同时 果判为阳性（图 2 ）。最终根据