猪链球菌对红霉素的耐药表型及耐药机制地研究.pdfVIP

2004学术年会 猪链球菌对红霉素的耐药表型及耐药机制的研究 李艳华。，姜成刚1，蔡雪辉1，童光志1，佟恒敏2 1．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨黑龙江150001 2东北农业大学动物医学院药理教研室，哈尔滨黑龙江150030 摘要：目的：研究猪链球菌对红霉素的耐药表型和耐药机制。方法：从发病猪体内分离并鉴定 猪链球菌，采用肉汤稀释法和琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌6株，用双纸片法确定耐药 猪链球菌的耐药表型，通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因ermb／mefA。结果：83．3％的青霉 素耐药株同时也耐红霉素；100％的耐药株表现为CMLS表型，即同时耐克林霉素；37．5％的红霉素耐 r 药株具有e mb基因，其余未能检测到ermb或mefA基因。结论：我国分离到的猪链球菌存在多 r 重耐药趋势，对红霉素的耐药表型是CMLS，引起其耐药机制由核糖体突变(emb基因编码) 引起，在这些耐药株中是否还存在其它机制还需进一步的研究。 关键词：猪链球菌；红霉素；耐药表型；耐药机制；ermb／mefA suis，S 猪链球菌病是由链球菌(Streptococcus 病的总称。急性常为出血性败血症和脑炎，慢性以关节炎、心内膜炎、淋巴结化脓等为特性。该 病分布范围极广，世界各地均有发生，且血清型众多，抗原结构复杂，是多年来一直困扰养猪业 的主要传染病之一。该病的防治主要有疫苗和药物，常用的药物有青霉素和红霉素，红霉素是14 元环大环内酯类药物，属于生长期抑制剂。本类药物的抗菌谱主要为革兰氏阳性菌及某些革兰氏 阴性球菌。在兽医临床主要应用的大环内酯类药物有红霉素和泰乐菌素，主要用于药物添加剂和 药物治疗。 国内外对于猪链球菌对红霉素的耐药机制研究还不深入，而对肺炎链球菌对红霉素的耐药 机制研究较完善，研究表明其主要通过3种作用方式产生耐药性：首先是靶位改变。对大环内 阻断大环内酯类抗生素与核糖体的结合。其次是主动外排系统，耐药基因mefA编码的外排蛋 白是一个能量依赖的膜蛋白，mefA依靠质子运动力泵出14、15元环大环内酯类抗生素。最后 23SrRNA和核糖体蛋白L4突变。最近，有报道在体外筛选的肺炎链球菌阿奇霉素耐药突变株 存在突变。 根据耐药机制的不同，链球菌对大环内酯类药物的耐药表型(pheno砂pe)也不相同。由靶位改 lincosamide 变引起的药物表型对大环内酯类、林可酰氨类和链阳菌素B(macrolide streptogramin macrolide lincosamide macrolidelincosamide streptogramin，cMLS)和诱导型(inducible 14、15元环大环内酯类抗生素耐药，而对16元环大环内酯类、林可霉素类及链阳菌素B仍敏感； 由主动外排系统引起的是一种新的耐药表型，它对14、15元环大环内酯类低水平耐药而对16元环 大环内酯类、克林霉素和链阳菌素B敏感，即M型。 随着大环内酯类药物在猪养殖业的广泛应用，对大环内酯类药物产生耐药性的猪链球菌菌株日 趋增多，但在我【虱关于其耐药机制和耐药表型的研究较少，本研究将从猪体内分离并筛选对红霉素 耐药的链球菌，确定耐药表型和其产生耐药的分子机制。 786囝2004学术年会 1材料与方法 1．1材料 1．1．1菌株：本研究采用的8株S suis系于2004年上半年采集于河南1株，哈尔滨5株分别为1、 3、4、5、8，辽宁2株，分别为辽宁1、辽宁2。8株Ssuis菌均从有病变的肺脏和扁桃体中分离。 1．1．2药敏片：红霉素、青霉素、克林霉素购买于杭州天河 1．1．3培养基及生化反应管：MH固体培养基、PPLO液体培养基、生化反应管购买于杭州天河 1．1．4其它分子生物学试剂购于宝生物工程有限公司 1-2方法 1．2．1菌株鉴定：。 1．2．2药物敏