氧化锌微孔纳米催化超氧歧化酶地直接电子传递研究.pdfVIP

B．077 氧化锌微孔纳米催化超氧歧化酶的直接电子传递研究 差益，邓子峰，芮琦，田阳’ 摘要：本文利用物理热蒸法在IT0上制备了ZnO膜修饰电极，并进行了电化学特性及光谱学特性的 一系列表征；实验结果表明修饰在ZnO修饰电极上的SOD保持了其生物活性，并实现了在电极表面 的直接电子传递，同时成功地构建了0z一传感器． 关键词：ZnO膜SOD直接电子传递O：一传感器 由于02-涉及到老化，癌症以及神经衰弱如帕金森症等疾病的病因，因此测定O：一的浓度具有十分 重要的意义．通常检测0：一的方法有光谱法，化学发光法以及电子自旋共振，然而由于02一的短寿命及 高活性，这些方法仅能做到定性检测，而不能实时检测n’引．而电化学方法可以适时在线定量检测 O：一的浓度变化． · 超氧化物岐化酶(SOD)作为O：一的专一识别酶可以极快的反应速率将0：一岐化为0：和H,Oz，氧化还 原都可进行测定，因此在氧化有干扰时，可以测定其还原电流，反之亦然。大大增加了SOD测定Oz一 的选择性及灵敏度．基于这些原因，人们致力于研究以SOD为基础的0：一安培传感器。修饰在以半胱 氨酸为介体的电极上的Cu，Zn-SOD的直接电化学已被研究，并且已做成生物传感器¨’”．本文首次 在不需要任何介体的情况下，实现了SOD在ZnO上的直接电子传递，并在此基础上构建了02一传感器。 1实验部分： ’ 1．1仪器与试剂 仪器：CHl660型电化学系统(cH COMPANY，美国)；D8X射线衍射仪(Bruker 司，美国)；Quanta200F场发射环境扫描电子显微镜(FEI AXS，美国)；ISM-5510扫描电子显微镜(日本电子株式会社) K3Fe(CN)s；稀硫酸； 试剂：SOD；ITO玻璃；锌片；无水乙醇；KOH；。KCl；磷酸盐缓冲液；10raM 所用试剂均用去离子水配制 I．2IT0底物的处理以及ZnO膜修饰电极的制备： ITO的清洗，在超声波清洗机中依次用无水乙醇，1MNaOH，去离子水清洗，得到有良好的亲水 性的ITO底物．采用物理热蒸法制得均匀的zn膜，然后将该zn膜置于马弗炉于烧结为ZnO膜。 1．3SOD／ZnO修饰电极的制备 将制得的ZnO膜浸入到PBS配制的0．2mMSOD溶液中，制得SOD修饰电极，定义为SOD／ZnO电 极，不用时存放于4℃的冰箱中． 2结果和讨论 2．1ZnO膜表面形貌的表征 膜，是一种多孔纳米膜，因此增大了其表面积，这为修饰蛋白质提供了条件。 B一077 FE-SEMofZnOfilm Figl image ‰p∞6∞ 2．2SOD／ZnO的直接电子传递 图2：SOD／ZnO修饰电极在PBS(pH=72)eeCVs； 率文对修饰于ZnO上曲蛋白质曲直接 插图为未修饰SOD的ZnO膜(a)和修饰电极 电子传递也进行了研究．固2为SOD修饰 SODtZnO(b)在PBs(pH=72)中扫建为100mVls 电极在10棚Bs(pH=725)中不同扫速下的 的CV目 d圉，插图是扫速为IOO州h下ZnO CVsofSOD／Zn0inlOmM at Fi92 PBS{pa=7．21 25】 fi【Ⅲ(a)和SOD／Zn0(b)在PBS(pH=7 differentsc,ma 溶液中的cV留，从