猪精液常温保存技术地研究.pdfVIP

● 中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会论文集 猪精液常温保存技术的研究 徐振军1’2任康1王彦平1赵冰2路永强3朱士恩¨ 医站，北京，100107) 摘要为研制更为简易、高效的保存稀释液配方及保存操作程序，充分发挥优良种公猪的生产潜力， 本实验对种公猪精液的常温保存技术进行了研究。结果表明：在常温(17℃±0．5)条件下，采用I 低廉，操作程序简便、易行。 关键词猪；精液；常温保存 随着家畜人工授精技术的广泛应用，精液保存技术越来越受重视。精液保存的目的是为了延长 精子的贮存时问及维持其受精能力，便于长途运输，扩大精液的使用范围，提高种公畜的配种效能。 对充分发挥优良种公畜的遗传潜力，降低传染病的传播机率，加快畜群品种改良步伐具有重要意义。 为了有效地开展猪的人工授精，精液的稀释保存是关键技术。精液冷冻保存技术的成功n3，使精液得 以长期保存，但对猪而言由于冷冻精液生产技术难度大，同时受成本高、受胎率较低、产仔数较鲜精 少控1等因素的制约，猪的精液冷冻保存技术仍处于试验研究阶段。因此，猪精液稀释保存技术的研究 成为热点。由于猪精子对低温耐受能力较差、容易发生冷休克∞1的特点，使得猪精液低温保存技术 的研究进展缓慢㈨。国际上，对猪精液的常温保存十分重视，多年来国外研究者做了大量工作，取得 了较好的效果岬1，我国的许多科研工作者从20世纪70年代开始就进行猪精液常温保存、授精效果和 稀释液配方研制等方面的研究，且取得了一定的进展口’10,11]。但由于所研制的稀释液配方大多成分复 杂、成本较高，且操作程序复杂，限制了该项技术的推广和应用。为解决生产中的实际问题，本实 验对猪精液的常温保存稀释液配方及保存技术进行深入研究。 1材料与方法 1．1稀释液的配制 供应站)、柠檬酸钠(化学纯，北京化工厂)。 1．1．2配制方法 按表1所示成分和剂量配制基础液，煮沸消毒后置于4℃冰箱贮存备用。稀释前取基础液86ml， 作者简介：徐振军(1965一)，男，内蒙古赤峰市人，中国农业大学高级访问学者 奉通讯作者 #北京市农委试验示范项目资助一种猪选育技术试验示范 4R4 中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会论文集 和渗透压测定仪(Wescor,5520，U．S．A)测定各稀释液的pH值、渗透压。 1．2精液的采集和品质评定 精液分别采自体况良好、性欲旺盛的3头大白种公猪。以手握法采精，收集浓份部分，经滤 纸过滤到保温杯中，在l～1．5h内运回实验室，并自然降温至室温(23℃±2)。室温下进行精液品 质评定，包括精子的活率、密度、pH值、渗透压和顶体完整率。原精活率达0．7以上、密度2×108 以上、色味正常的用于实验。 表1稀释液基础液成分和剂量 TabIe1 and ofbasicdiIuents Compositionsdosage 1．3精液的稀释和保存 在室温下精液常规检查完成后，将符合要求的新鲜精液分别与四种保存稀释液按1：3的比例 混合，直接置于17(2生物培养箱中保存。每隔12h轻轻摇动精液一次，并检测精予活率和顶体完整 率，直至精子死亡。 1．4精子活率评定 将稀释精液摇匀后，取中层精液lOIxl制片，置于配有37*(2恒温台的相差显微镜下，放大400 倍观察精子，分别计数呈直线运动精子数和总精子数，计算活率。 1．5精子顶体染色 采用姬姆萨(Giemsa)染色法，测定精子顶体完整率。将精液摇匀后，取中层精液制作精子抹 油镜下观察精子300个以上。分别计数顶体完整精子数和总精子数，计算顶体完整率。 1．6数据处理 采用t检验及方差分析进行数据处理，实验重复5次以上。 2结果 2．1不同稀释液对猪精液保存效果的影响 用四种保存稀释液对猪精液进行常温保存，结果表明：在常温(17(2±0．5)条件下，用I液保 果无显著差异，72h内I液和III液无显著性差异(P0．05)(图1)。 2．2不同保存稀释液内猪精子顶体完整率的变化 在四种稀释液中稀释保存猪精液，精子顶体完整率均呈缓慢下降趋势，并且在72h内无显著性 整率(7