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HPLC法测定牛鲜茶中白鲜碱的含量 　　【摘要】目的：研究牛鲜茶中白鲜碱的含量测定方法。方法：用乙醇超声提取，以SapphireC18。色谱柱为固定相，甲醇一水(52：48，v／v)为流动相，检测波长为220nm。结果：阴性样品无干扰，方法专属性良好；在244.8ng~~571.2ng范围内，白鲜碱的峰面积与进样量有良好的线性关系，R2=0.9999；平均回收率为99.5％，RSD=0.77％；供试品溶液在8小时内稳定性良好。结论：方法快速，简便准确，可用于该制剂的稳定性考察及成品质量控制。 　　【关键词】高效液相色谱法；牛鲜茶；白鲜碱；含量测定 　　牛鲜茶是由牛蒡子、白鲜皮等十余味中药材通过提取、干燥后制成茶剂用高温的水浸泡产生的茶汤，包含有多种微量珍贵成分，可快速进入血液循环，清除血液中的毒素和淤积物，清除血毒，促使患者血液结构恢复正常。平衡血液细胞，可清除血液白细胞营养物质，阻断白细胞过量分泌，从而抑制tnf（肿疡坏死因子）的产生，阻断牛皮癣发病根源。平抑表皮细胞分裂，茶汤中的有效成分结合核心物质“脎酚”，可平抑表皮细胞的活性，使表皮细胞分裂恢复，促使表皮细胞彻底角化，改变表皮层层脱屑状况，杜绝瘙痒，改善皮损。白鲜皮为牛鲜茶的主要成分，而白鲜碱为其重要活性成分，为了能更有效地控制其质量，本文采用高效液相色谱法建立了白鲜碱的含量测定方法。 　　1仪器与试药 　　日本岛津全自动高效液相色谱仪，型号：LC-20AT，配备LC工作站甲醇为色谱纯，水为重蒸溜水，其余为分析纯。白鲜碱对照品（批号：111654-200301）由中国药品生物制品检定所提供；牛鲜茶（批号20090602由哈药集团三精千鹤制药有限公司提供，规格均为每袋装1.5克。 　　2方法与结果 　　2.1色谱条件色谱柱为SapphireC18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇一水(52：48)；检测波长：220nm；流速：1.0ml/min；进样量10μl；柱温30℃。 　　2.2对照品溶液的制备精密称取白鲜碱对照品19．4mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.3供试品溶液的制备取本品细粉3.0g，精密称定，加乙醇20ml，超声处理10min，滤过，滤渣再加乙醇20ml超声处理一次，滤过，合并滤液，减压回收溶剂，残渣加甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45?m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 　　2.4阴性干扰试验:取不含白鲜皮的阴性样品，照供试品溶液制备方法制成阴性溶液。精密吸取供试品溶液，阴性溶液，对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪中，绘制液相色谱图。 　　由色谱图提示，在对照品色谱峰相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性溶液在此峰位无吸收，对本制剂中白鲜碱含量测定无干扰，方法专属性良好。 　　2.5线性试验:精密称取白鲜碱对照品，加甲醇制成每1ml含1.02mg的对照品储备溶液，分别精密吸取6ml、8ml、10ml、12ml、14ml对照品储备溶液，置25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，既得。精密吸取10μl注入液相色谱仪中，测定色谱峰面积，绘制色谱图。测定结果见表。 　　以白鲜碱进样量为横坐标，峰面积为纵坐标做回归曲线，得回归方程为Y=2606X-26476,R2=0.9999。由结果可见，白鲜碱进样量在244.8ng~~571.2ng之间线性关系良好。 　　2.6精密度试验:精密吸取浓度为0.388mg/ml的白鲜碱对照品溶液10μl，注入液相色谱仪中，测定色谱峰面积，重复进样6次，绘制色谱图。测定结果见表。由结果可见，测定方法精密度良好。 　　2.7重复性试验:取牛鲜茶样品（批号，照含量测定项下方法，在同一实验室由同一人进行含量测定，样品6份，按供试品溶液制备方法制备溶液，依法进样测定绘制色谱图。结果见表。 　　由结果可见，测定方法重复性良好。 　　2.8回收率试验:取牛鲜茶样品1.5g（批号1.5040g/袋，已知白鲜碱含量1.92mg/g），精密称定，精密加入白鲜碱对照品3mg，照含量测定项下方法进行含量测定，重复6次，绘制色谱图。结果见表。 　　由结果可见，回收率在95％～105％之间，RSD值为0.77％。测定方法回收率良好。 　　2.9供试品溶液稳定性试验:取牛鲜茶样品（批号，制成供试品溶液，照上述含量测定项下方法，分别于0、2、4、6、8小时进行含量测定，绘制色谱图。结果见表。 　　由结果可见，供试品溶液在8小时内稳定性良好，含量测定应在8小时内完成。 　　2.10取3批样品，按上述含量测定项下方法测定含量，结果见表。 　　3小结与讨论