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胃癌-树突状细胞融合细胞疫苗制备及其形态学观察_医学论文 胃癌-树突状细胞融合细胞疫苗制备及其形态学观察_医学论文 作者：张坤　余佩武　高朋芬　饶云 ［摘 要］ 目的 利用细胞融合技术，获取胃癌细胞-树突状细胞融合细胞疫苗，并对其形态学特点进行观察，为基于树突状细胞（DC）的融合疫苗研究及应用提供实验基础。 方法 利用聚乙二醇（PEG）诱导胃癌细胞、DC融合，HAT、HT筛选培养系统对融合细胞进行筛选培养，获取纯净融合疫苗利用光镜、电镜对其形态学特点进行观察。 结果 胃癌-DC细胞融合后，体积明显增大，悬浮生长，细胞表面树枝状突起较亲代DC明显短小、稀少。 结论 胃癌-DC融合细胞保持类似于亲代DC的悬浮生长特性，但数量减少、体积明显增大，具备与两种亲代细胞均不相同的形态学特性。 　　［关键词］ 胃癌细胞树突状细胞融合细胞疫苗形态学 　　Preparation and morphological characteristics of gastric cancer cell-dendritic cell fusion vaccine 　　Abstract:Objective To obtain gastric cancer cell-dendritic cell fusion vaccine by using the cell fusion technology and to observe the morpho-logical characteristics of the fusion cells.Methods The gastric cancer cells and dendritic cells were fusioned by PEG and selected by the HAT.HT culture systems.The morphological characteristics of the fusion cells were examined under light and electron microscopes.Results The fusion cells became much larger than their parental cells，but the cell number decreased remarkably.The fusion cells less in suspended in the culture medium and the protuberances on the surface of the cells became short and sparse.Conclusion The gastric cancer cell-dendritic cell fusion cells kept the growth feature of suspension as their parental dendritic cells，but were much larger and less in number.These morphological characteristics are typi-cal and different from their parental cells. 　　Keywords:gastric cancer celldendritic cellfusion vaccinemorphology 　　胃癌是严重威胁人类健康的常见消化道恶性肿瘤之一，近年来生物治疗手段的不断完善与发展为改善胃癌患者的预后带来希望。各国学者利用细胞免疫和基因工程技术，进行各种肿瘤疫苗的研究，尤其是基于DC的抗肿瘤疫苗研究，取得了许多可喜的成就。既往基于树突状细胞（DC）的抗肿瘤疫苗研究主要有:用癌细胞冻融 ［1］ 、超声粉碎［2］ 等方法获取癌细胞裂解产物，将其作为粗提抗原刺激DC，将癌细胞抗原决定簇mRNA转入DC，将DC与癌细胞混合培养等。上述多种手段虽都能在一定程度上增强DC的功能，并增强机体的抗肿瘤免疫能力，但其本身仍存在许多局限性。为此，本实验尝试利用细胞融合技术，将DC与胃癌细胞进行融合制备融合细胞疫苗，并对其形态学变化特点进行观察。希望能为胃癌DC瘤苗的研究提供新的实验基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 主要试剂 　　DMEM培养基（Gibcol Brl），淋巴细胞分离液（TDB公司），rhGM-CSF（Promega），rhIL-4（RampD System），TNF-α（RampD System），聚乙二醇（Polyethylene glycol，Sigma），次黄嘌呤（Hypoxanthine，Sig-ma），氨基喋呤（Amin