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胶质源性神经营养因子对损伤的培养大鼠背根神经节的作用_医学论文 胶质源性神经营养因子对损伤的培养大鼠背根神经节的作用_医学论文 作者：毕辉　杨浩　杜亮　胡三觉 【关键词】 胶质源性神经营养因子 　　关键词: 胶质源性神经营养因子神经节，脊海人藻酸神经毒素类细胞培养 　　摘 要:目的 应用体外培养海人藻酸（KA）兴奋性毒素损伤的细胞模型，研究GDNF对损伤的背根节神经元的不同作用，为进一步研究GDNF对神经元作用机制，表达产生及检测方法提供思路. 方法 采用原代培养的方法，用N1无血清分离培养背根节神经元，再用5μmol L-1 KA作用6～8h，加上含有GDNF的无血清培养基，继续培养24h，然后用MTT法检测反映细胞的活性，胎盘蓝染色记数、细胞总蛋白测定以及形态学观察突起的生长状况. 结果 ①细胞活性A值:GDNF+KA（0.0328±0.006），KA（0.0285±0.0075），GDNF（0.0398±0.002），Blank（0.041±0.002）（0.05）②活细胞数相应为GDNF+KA（60±4.4），KA（35.7±2.2），GDNF（59.3±3.6），Blank（57.7±2.9）③细胞的总蛋白分别为GDNF+KA（70.3±9.2）（0.01），KA（49.0±3.7），GDNF（75.0±7.3），Blank（68.0±5.5）（0.01）④突起长度:实验组与对照组不明显，GDNF组与空白对照组不明显. 结论 在正常无血清体外培养情况下GDNF对DRG神经元作用不明显，在KA兴奋性毒素损伤后，对细胞的活性、存活及总蛋白合成有明显的保护作用，但对突起的生长则没有明显的促进作用. 　　Abstract:AIM To study the different effects of glial-de-rived neurotrophic factor（GDNF）on injured dosal root gan-glion（DRG）neurons using injurious model of neurons in-duced by kainic acid in vitro，so as to provide new thoughts for studying functional mechanism，expression pattern，and bioassay methods of GDNF.METHODS Primarily cultured DRG neurons were dissected from neonatal rats in N1serum-free medium，and then kainic acid medium was added into cul-tures at the final concentration of5μmol L-1 and incubated for6～8h.The next step was performed to culture in DF12serum-free medium supplemented with GDNF for24h.Eventually，MTT was used to test viability of cells by value.Trypan blue staining cell count and total protein of neurons were determined.DRG neurons were observed to detect the neurite length.RESULTS ①A values for viability of cells:GDNF+KA（0.0328±0.006）KA（0.0285±0.0075）GDNF（0.0398±0.002）Blank（0.041±0.002）.②Cell count:GDNF+KA（60±4.4）KA（35.7±2.2）GDNF（59.3±3.6）Blank（57.7±2.9）.③Total protein of cells GDNF+KA（70.3±9.2）KA（49±3.7）GDNF（75±7.3）Blank（68±5.5）（0.050.01）.④Neurite length:Remarkable differences existed neither between ex-perimental groups and control groups，nor between GDNF groups and Blank.CONCLUSION GDNF has no distinct ef-fects on DRG neurons in normal