余振喜---紫外分光光度计的使用和维护.pdfVIP

紫外-可见分光光度法 及其在药物分析中的应用 中国食品药品检定研究院 化学药品检定所 抗肿瘤与放射性药品室 余振喜 中国·烟台 中国食品药品检定研究院 2013.07.20 National Institutes for Food and Drug Control 主要内容 一、基本知识 二、紫外-可见分光光度计 三、紫外-可见分光光度计的检定 四、测定方法 五、注意事项 National Institutes for Food and Drug Control 一、基本知识 紫外 - 可见分光光度计法 (Ultraviolet-Visible Spectrophotometry ，UV-Vis) ：就是通过被测物质在紫 外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范围内 的吸光度,对该物质进行定性和定量分析的方法。 本法在药品检验检测中主要用于药品的鉴别、检查 和含量测定。 National Institutes for Food and Drug Control 一、基本知识 物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子 跃迁所产生，因此，紫外吸收主要取决定于分子的电子结 构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如 含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区（200- 400 nm）或可见光区（400-850 nm）产生吸收。通常使用 的紫外-可见分光光度计的工作波长范围为190-900 nm。 National Institutes for Food and Drug Control 一、基本知识 电磁波谱： 波长 200 400 800 3200 (nm) g -X-射线 紫外 可见 红外 微波 无线电 真空紫外 近红外 核磁共振 波长越短，能量越高 National Institutes for Food and Drug Control 一、基本知识 定性鉴别： ① 规定最大吸收波长、最小吸收波长或有无肩峰； ② 规定一定浓度的供试品溶液在最大吸收波长处的吸光度； ③ 规定特定吸收波长下的吸收系数； ④ 规定特定吸收波长下不同吸收峰处的吸光度比值； ⑤ 规定经化学反应后产物的吸收光谱特性。 杂质限度检查： ① 若该物质本身在紫外光区无吸收，而其杂质在紫外光区有 相当强度吸收； ② 杂质的吸收峰处该物质无吸收，则可用本法作杂质检查。 National Institutes for Food and Drug Control 一、基本知识 定量分析： 通常选择在物质的最大吸收波长处测出吸光度，然后 用对照品的吸光度或吸收系数计算出被测物质的含量，多 用于制剂的含量测定 （溶出度/含量均匀度/含量测定）。 依据：朗伯-比尔 （Lambert-Beer）定律 数学表达式：A=lg （1/T）=