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生化分析: Bioanalysis is a sub-discipline of analytical chemistry covering the quantitative measurement of xenobiotics (drugs and their metabolites, and biological molecules in unnatural locations or concentrations) and biotics (macromolecules, proteins, DNA, metabolites, etc.) in biological systems. 光谱：复色光经色散系统分光后，按波长分子光谱（或频率）的大小依次排列的图像 吸收（根据吸收波段不同细分）: 紫外-可见/红外 发射（根据发射原理不同细分）光致发光： 电磁波谱：将电磁辐射按照波长或频率的大小顺序排列起来即称为电磁波谱 第一章：紫外-可见光光度法 紫外-可见分光光度法( ultraviolet and visible (UV-vis) spectrophotometry) 基于分子外层价电子跃迁产生的在紫外-可见光谱区的吸收光谱进行分析的一种常用的光谱分析方法。（200-780nm） 分子吸收光谱：用一连续波的电磁辐射以波长大小顺序分别照射分子，并记录物质分子对辐射吸收程度随辐射波长变化的关系曲线，这就是分子吸收曲线，通常叫分子吸收光谱。 电子：σ电子 → 饱和的单键 、π电子 → 不饱和的双键、三键 、n电子 → 孤对电子 轨道：成键轨道、反键轨道 能级高低为：σπ n π* σ* 1.σ→σ* 跃迁：饱和烃（ C-CC-H ） 能量很高，λ150 nm 2. n→σ* 含杂原子饱和基团（-OH-NH2），能量较大，λ150~250 nm 3. π→π*不饱和基团（C=CC ≡ C ），能量较小，λ~ 200nmE更小，λ 200nm 4.n→π*跃迁： 含杂原子不饱和基团（C N ，C=O ），能量最小，λ 200~400nm n →π* 或π→π* 跃迁的基团（能吸收紫外-可见光的基团） 2 助色团：带有非键电子对的基团；可使生色团吸收峰向长波方向移动并提高吸收强度的一些官能团 3. 红移：吸收峰的波长向长波方向移动，这种效应称为红移效应。 4．蓝移（紫移）：吸收峰的波长向短波方向移动，这种效应称为蓝移（紫移）效应。 5．增色效应：使吸收强度增加的现象称为增色效应 6 .减色效应：使吸收强度降低的现象称 影响紫外-可见光光度法的因素：1 共轭效应：共轭体系越长， π与π*的能量差越小，红移效应和增色效应越明显。 2 立体化学效应：空间位阻、跨环效应 3 溶剂的影响：溶剂效应 4 体系pH的影响 互补色光：白光除了可由所有波长的可见光复合得到外，还可由适当的两种颜色的光按一定比例复合得到。能复合成白光的两种颜色的光 朗伯-比尔定律——定量分析的基础:I0=Ia + It + I 透光率——透光率表示透过光强度与入射光强度的比值，用T来表示，计算式为：T = It/I0 T常用百分比（%）表示。 吸光度——透光率的倒数的对数叫吸光度。用A表示：A = -lgT = lg(I0/It) 朗伯-比尔定律：当用一束强度为I0的单色光垂直通过厚度为b、吸光物质浓度为c的溶液时，溶液的吸光度正比于溶液的厚度b和溶液中吸光物质的浓度c的乘积。数学表达式为： A = lg(I0/It) = Kbc 第二章 红外光谱 红外光谱法：（infrared spectrometry, IR）分子振动转动光谱、吸收光谱。指利用物质对红外光区电磁辐射的选择性吸收特性来分析分子中有关基团结构的定性、定量信息的分析方法，又称红外吸收光谱法或红外分光光度法。（0.78um-1000 um） 红外光谱主要由分子的振动能级跃迁产生，分子的振动能级差远大于转动能级差，分子发生振动能级跃迁必然同时伴随转动能级跃迁 基频峰：分子吸收一定频率红外线，振动能级从基态跃迁至第一振动激发态产生的吸收峰（即υ=0 → 1产生的峰） 红外产生的条件：分子吸收红外辐射的频率恰等于分子振动频率整数倍 红外活性振动：分子振动产生偶极矩的变化，从而产生红外吸收的性质 不产生红外吸收的性质 震动自由度：线性分子F=3n-5，非线性分子：F=3n-6 基团频率：不同分子中同一类型的基团的振动频率是非常相近的，都在一较窄的频率区间出现吸收谱带，这种吸收谱带的频率称为基团频率. 瑞利散射指散射光波长等于入射光波长,没有频率位移（无能量变化，波长相同）的弹性光散射. 瑞利散射光的強度和入射光波长λ的4次方成反比。 天空为什么是蓝色的：白天，太阳光在穿过大气层时，各种波长的光都要受