硫酸海胆内容物多糖化学结构的质谱法研究.pdfVIP

第 27卷 ，第 2期 光 谱 实 验 室 Vo1．27．No．2 2010年 3月 ChineseJournalofSpectroscopyLaboratory M arch ，2 0 10 硫酸海胆内容物多糖化学结构的质谱法研究 白日霞“， 王长海①“ (大连理工大学环境科学与生命学院 辽宁省大连市 11~b24) ^(大连民族学院生命科学学院 辽宁省大连市开发区辽河西路 18号 116600) 摘 要 将海胆 内容物硫酸多糖 XB一3进行脱硫得到多糖 XB一3D。分别对 XB一3和 XB一3D进行 甲基 化 ，对脱硫前后的部分 甲基化糖进行气相色谱一质谱测定，通过质谱分析法得出XB一3和XB一3D的结构信 息，包括其主链和支链 的构成、连接方式、硫酸基取代位置和结构模型。 关键词 海胆；硫酸多糖 ；结构；质谱法 中图分类号：0636．1；0657．63 文献标识码：A 文章编号：1004—8138(2010)02—0665—04 1 引言 海胆是海洋中的一种棘皮动物 ，其内容物具有止痛、软坚散结、化瘀消肿、清热消炎、健脾强肾、 舒筋活血等药用功效 ，海胆卵有滋阴补肾，养颜护肤的作用，具有很高的营养价值 ，用海胆卵制成的 食品具有提高机体免疫力，安神补血和促进性功能。近年来 ，日本 、法国、美国、德国和港澳 的消费 者，都把海胆视为高档名贵的高级保健食品。 研究表明，棘皮动物中含有硫酸多糖 ，硫酸多糖具有抗凝血 ，降血脂 ，抗肿瘤 ，抗病毒 ，增强机体 免疫机能等多种生物学活性 。硫酸基团往往有单取代或双取代 ，硫酸基的含量和位置对硫酸多糖的 生物活性有重要影响口，有的自身无抗病毒活性的多糖经硫酸酯化后，表现出抗病毒活性，有抗病 毒活性的硫酸酯多糖脱去硫酸基团后，失去了抗病毒活性。硫酸基一方面提供了在其抗病毒活性中 起重要作用的负电荷，另一方面可使多糖的立体结构发生变化 。 硫酸多糖的结构随着来源的不同有较大的差异，采用红外光谱来判断硫酸基的位置是比较常 用的方法0，本文通过海胆内容物硫酸多糖为研究载体，采用质谱法对硫酸多糖的一级结构进行了 研究。 2 实验部分 2．1 材料和仪器 新鲜马粪海胆于 2007年秋季采自大连金石滩海域，将海胆壳和 内容物分离，分别水洗、晾干； 取干燥的海胆内容物经脱脂、热水煮沸、浓缩、去蛋白、去核酸、脱色、醇分级和柱层析等一系列步 骤，得到硫酸海胆内容物多糖XB一3；利用高效液相色谱证明了多糖 XB一3的组分均一性，XB一3经水 解、衍生化和气相色谱分析，确定XB一3由半乳糖、葡萄糖和硫酸基组成 。 GCMS—QP2010型气一质联用仪 (日本岛津公司)；NicoletAVATAR370DTGS红外光谱仪(美 ① 联系人+电话：(0411手机：(0E—mail：brx@dlnu．edu．all或 chwang2001@sina．com 作者简介：白日霞 (1964一)，女(蒙古族)，黑龙江省杜蒙自治县人，教授，主要从事多糖和寡糖化学的研究工作 收稿 日期：2010—02～01；接受 日期：2010—02—19 光谱实验室 第 27卷 国Thermo公司)；OV一225毛细管色谱柱 (30．0m×0．33~mX0．25mm，中国科学院兰州化学物理研 究所色谱技术研究开发中心)，DZ一1A型真空干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)；三氟乙酸、二 甲基亚枫、无水吡啶、乙醇 、碘 甲烷 、氯仿、甲酸、甲醇、乙酐 、硼氢化钠为国产分析纯试剂；盐酸 、草 酸、三氧化锑、氯化钡、玫瑰酸钠 、NaOH、NOHCO。为国产化学纯试剂。实验用水为蒸馏水 。 2．2 红外光谱分析 采用 KBr压片法，在 4000--400cm 区间分析。 2．3 脱硫酸基 称取多糖 100mg，加入二 甲基亚砜 9mI，120|C加热 15min，使多糖全部溶解 ，冷却 ，加入 500~I 吡啶 ，150mg草酸 ，200mg三氧化锑，最后补充 lmI吡啶，120~C反应 3h，待反应液冷却后加入 5mL