青天葵活性部位的体外抗肿瘤作用研究_药学论文.docVIP

青天葵活性部位的体外抗肿瘤作用研究_药学论文 青天葵活性部位的体外抗肿瘤作用研究_药学论文 作者：钟振国 袁叶飞 周燕园 甄汉深 梁臣艳 【摘要】 　　目的确定广西特产药材青天葵体外抗肿瘤作用的活性部位。方法青天葵部位提取物的制备主要采用溶剂法, 青天葵全草先用95%的乙醇提取，得到的提取物进一步用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇、甲醇依次提取，得到极性由小到大的4个提取部位。活性筛选采用MTT法实验，观察青天葵提取物对7种肿瘤细胞的生长抑制作用。结果青天葵石油醚和醋酸乙酯部位具有一定的体外抗肿瘤作用。结论首次确定了青天葵的石油醚和醋酸乙酯部分是体外抗肿瘤作用的有效部位。 【关键词】 青天葵 体外抗肿瘤作用 活性部位 　　Abstract：ObjectiveTo determine the active fraction with anticancer effect in vitro from Nervilia foadii(Hance) Schltr.MethodsThe samples were prepared by solvent extraction. The whole Nervilia foadii(Hance) Schltr. was extracted with 95% ethanol at first,and then the ethanolic extract was separated with petroleum ether, ethyl acetate, n-Butyl alcohol and methanol in turn to get four fractions from small to large in polarity. The MTT experiment was made for active screening. The inhibiting influences of extracts from Nervilia foadii(Hance) Schltr. on growth of seven kinds of human tumor cells were observed. ResultsPetroleum ether extract and ethyl acetate extract both had some anticancer effects in vitro. ConclusionIt is the first time that the petroleum ether extract and ethyl acetate extract of Nervilia foadii(Hance) Schltr. are proved to be the effective anticancer fractions in vitro. 　　Key words： Nervilia fordii(Hance) Schltr., Anticancer effect in vitro, Active fraction 　　青天葵为兰科Orchidaceae植物毛唇芋兰Nervilia foadii(Hance) Schltr.的干燥全草，入药始载于《岭南采药录》，主要产于我国的广西、广东、海南，四川、云南，泰国也有分布，是广西特产药材［1～3］，具有清肺止咳、健脾消积、镇痛止痛、散淤消肿、清热解毒之功效，主治肺痨、咳嗽咳血、中毒、跌打损伤、小儿疳积、精神病、口腔炎、急性咽喉炎等症。近来还用含有青天葵的复方制剂治疗鼻咽癌以缓解症状［4］，但未发现国内外对其抗肿瘤有效成分及药理作用的研究。为此，笔者对青天葵的干燥全草进行了药效学实验研究，对青天葵的石油醚、氯仿、醋酸乙酯、甲醇4个不同部位采用体外抗肿瘤实验进行初筛，为阐明青天葵的抗肿瘤作用并筛选出有效部位打下基础。现报道如下。 　　1 材料与仪器 　　1.1 受试样品 　　药材青天葵来源于南宁药材站，经广西中医学院刘寿养副教授鉴定为兰科Orchidaceae植物毛唇芋兰Nervilia foadii(Hance) Schltr.的干燥全草。对青天葵的干燥全草进行提取分离得4个部位：石油醚提取物（A）、醋酸乙酯提取物（B）、正丁醇提取物（C）、乙醇提取物（D）。A，B，C和D均用含有DMSO的培养液溶解，均配成浓度为480 μg/ml的溶液，置于-20℃冰箱密闭避光保存。临用前用不含血清和抗生素的RPMI1640（NG108-15用DMEM）液稀释至所需浓度，DMSO终浓度在0.01%水平。 　　1.2 培养液 　　1.2.1 RPMI完全培养液含RPMI1640培养基（GIBCO）、3%谷氨酰胺、卡那霉素750 μg/ml、10% FBS（临