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蓖麻油甾醇组成及其对大鼠蜕膜细胞的影响_药学论文 蓖麻油甾醇组成及其对大鼠蜕膜细胞的影响_药学论文 作者：张小雪 段双全 韩峰 高平 刘世贵 【摘要】 　　目的进一步探明蓖麻油中的抗生育物质成分。方法利用皂化和萃取,从蓖麻油中提取甾醇,用GC-MS分析蓖麻油甾醇成分；用MTT法检测蓖麻油甾醇对原代培养大鼠蜕膜细胞活力的影响。结果蓖麻油总甾醇的主要成分为γ-谷甾醇（43.02%）、豆甾醇（27.15%）、岩藻甾醇（11.43%）、麦角甾-5-稀-3 -醇（6.00%）和普罗布考（7.46%）。蓖麻油甾醇对细胞活力有抑制作用，其半抑制剂（IC50）剂量为：(88.45±3.196) μg/ml,r=+0.9549；抑制作用具有量-效关系。结论在蓖麻油甾醇的主要成分中，γ-谷甾醇（r-Sitosterol）可能是抑制原代培养大鼠蜕膜细胞活力的主要成分，而豆甾醇（stigmasterol）可能起协助的作用。 【关键词】 蓖麻油 甾醇 原代培养大鼠蜕膜细胞 气相色谱-质谱联用分析 四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法 　　Abstract：ObjectiveTo assay the constituents of phytosterol of castorbean seed oil and the inhibition on the viability of primary cultured rat decidual stormal cells (DSC). MethodsThe methods of GC-MS analysis and MTT method were adopted, respectively. ResultsThe main constituents of phytosterol of castorbean seed oil were γ-Sitosterol (43.02%), Stigmasterol (27.15%), Fucosterol (11.43%), Probucol (7.46%) and Ergost-5-en-3-ol (6.00%); the phytosterol possessed inhibitory activity on the viability of primary cultured rat DSC in a dose dependent manner. The IC50 was （88.45±3.196）μg/ml, r= +0.954 9. Conclusion The γ-Sitosterol may act as the main contributor in the inhibition on the viability of DSC，and the Stigmasterol might act as an assistant. 　　Key words：Castorbean seed oil; Phytosterol; Primary cultured rat decidual stormal cells; GC-MS analysis; MTT method 　　蓖麻Ricinus communis L.为大戟科一年生或多年生草本植物，原产于非洲，我国各地均有栽培。蓖麻不仅是著名的油料作物，而且是重要的中药材。在我国，蓖麻籽具有消肿拔毒、泻下通滞、消除痈疽肿毒、导泻等［1］功能，临床上用蓖麻油炒鸡蛋进行催产已有多年的历史［2，3］；在一些非洲国家，妇女用蓖麻籽进行避孕［4］。有文献报道，蓖麻籽提取物具有抗雌鼠和雄鼠生育的作用［5～8］。本实验室秦晓娜蓖麻油抗小鼠生育实验表明，蓖麻油抗小鼠早孕的抑制率达80%以上，抗小鼠着床抑制率达100%［9］。我们在对蓖麻油抗鼠类生育作用机理的研究中，发现蓖麻油引起小鼠子宫内腔扩大，子宫壁和肌肉层明显变薄；肌纤维排列疏松、紊乱；子宫基质层变薄，其内腺体减少；黏膜上皮增厚。离体实验表明，蓖麻油对原代培育SD大鼠蜕膜细胞活力有抑制作用。然而，在蓖麻油中，是哪一种或哪几种物质起着抗生育作用还未见有文献报道。在许多植物油中，甾醇具有多方面生理功能。本实验通过皂化获得蓖麻油甾醇，用MTT法检测蓖麻油甾醇对大鼠蜕膜细胞活力的作用，用GC-MS检测甾醇的主要成分，以进一步探明蓖麻油中的抗生育物质成分。 　　1 器材与方法 　　1.1 材料和甾醇的提取受试蓖麻籽购自成都五块石中药市场。蓖麻油由本实验室提取，参照秦晓娜方法进行［9］，略有改动。小心去壳后，用粉碎机将蓖麻籽粉碎，加入95%乙醇，匀浆；在60℃水浴中提取96 h，10 000 r/min离心30 min(0℃)；弃沉淀，留上清，挥发除去乙醇得乙醇提取物。此提取物用乙醚在50℃条件下索式提取