阿魏酸乙酯抗ADP诱导的血小板聚集及其机制_医学论文.docVIP

阿魏酸乙酯抗ADP诱导的血小板聚集及其机制_医学论文 阿魏酸乙酯抗ADP诱导的血小板聚集及其机制_医学论文 作者：王汝涛　熊晓云　刘莉　张峰　招明高　贾敏　李晨　梅其炳 【关键词】 阿魏酸乙酯 关键词: 阿魏酸阿魏酸乙酯血小板钙离子 摘 要:目的 观察阿魏酸乙酯抗二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集作用，及其对血小板细胞内钙波动的影响. 方法 在含有阿魏酸乙酯和阿魏酸的兔富含血小板血浆（PRP）中加入ADP诱导血小板的集聚，以200mL#12539L-1 聚乙二醇为对照，用TYXN-91智能血液凝集仪观察血小板聚集率，激光共聚焦显微镜观察血小板细胞聚集时细胞内钙离子的变化情况. 结果 不同终浓度（0.1，0.5，1.5和3.0mmol#12539L-1 ）的阿魏酸乙酯对ADP诱导的血小板聚集抑制百分数分别为（%）26.3±3.3，33.4±2.4，73.4±3.1和94.9±2.7，均显著高于等浓度的阿魏酸水平（n=8，0.05）.在阿魏酸乙酯作用下ADP诱导的血小板细胞内钙离子荧光强度的变化（ΔFI）为4.6±1.7，明显低于对照值ΔFI（10.3±2.6）（n=8，0.01）. 结论 阿魏酸乙酯抑制由ADP诱导的血小板聚集作用比阿魏酸强. 　　Keywords:ferulic acidethyl ferulateblood plateletscal 　　Abstract:AIM To investigate the inhibitory actions of ethyl ferulate on platelet congregate induced by ADP，and the ef-fect of platelet intracellular calcium oscillations.METHODS To observe platelet congregate rate induced by congregater TYXN-91.200mL#12539L-1 polyethylene glycol400as contral.Platelet intracellular calcium oscillation were observed by laser scanning.RESULTS Ethyl ferulate Inhibitions rate were（%）26.3±3.3，33.4±2.4，73.4±3.1and94.9±2.7，（n=8）at different concentration（0.1，0.5，1.5and3.0mmol#12539L-1 ），significantly increased than that of the group of ferulic acid，the change ofΔFI4.6±1.7is much lower than resting level10.3±2.6（n=8，0.01）.CON┐CLUSION The inhibitive effect of Ethyl ferulate on platelet congregation induced by ADP was much more than that of ferulic acid. 　　0 引言 　　阿魏酸是多种中药的有效单体成分，具有多种药理作用［1，2］ .由于阿魏酸分子结构中的烷烃链较短，分子亲水性较强，难以通过生物膜发挥其抗凝血作用.我们从增加分子亲酯性考虑，在其烷烃链上增加酯键，合成了阿魏酸乙酯.初步验证其生物活性强于阿魏酸，进一步观察其对血小板细胞内钙离子浓度的影响，发现阿魏酸乙酯可抑制由ADP诱导的细胞内钙离子升高，进而抑制血小板的集聚. 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 ①阿魏酸系上海化学试剂一厂产品阿魏酸乙酯系第四军医大学药理学教研室提供Flu-o3-AM:用美国分子探针公司生产的二磷酸腺苷（ADP）购自美国Sigma公司.其他试剂均为国产分析纯试剂.②TYXN-91智能血液凝集仪为上海通用机电技术研究所生产MRC-1024激光共聚焦系统为美国Bio-Rad公司生产.③新西兰兔8只，雌雄不拘，体质量（2.5±0.2）kg，第四军医大学动物中心提供. 　　1.2 方法 　　1.2.1 血小板血浆的制备和聚集性测定 将兔戊巴比妥钠ip麻醉后，颈动脉取血，按常规方法制备富含血小板血浆（PRP）和无血小板血浆（PPP）.阿魏酸和阿魏酸乙酯用200mL#12539L-1 聚乙二醇溶解，以200mL#12539L-1 聚乙二醇为空白对照，PPP调零点.准确吸取PRP0.45mL移入测定皿中，分别加入不同浓度的阿魏酸和阿魏酸乙酯0.05mL，37