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分析化学(FENXI 评述与进展 第5期 第37卷 HUAXUE) Chinese of 764—771 2009年5月 JournalAnalyticalChemistry 生物毒素检测技术研究进展 暴铱 郭磊 陈佳 林缨 谢剑炜’ (军事医学科学院毒物药物研究所，北京100850) 擒耍生物毒素是一类具重要的生物源化学物质，具有广泛的民用价值和军事意义。本文简要介绍了各类 主要生物毒素的结构及性质，重点综述了生物毒素检测技术的原理、优缺点及其最新研究进展。 关键词生物毒素，检测方法，综述 1 引 言 生物毒素(biologicaltoxins)是生物机体分泌代谢或半生物合成产生的、不可自复制的有毒化学物 质，包括动物、植物、海洋生物和微生物等产生的对其它生物物种有毒害作用的各种化学物质。生物毒 素的研究具有广泛的民用价值和军事意义。作为治疗药物、抗癌导向药物和预防疫苗，生物毒素及其作 用机理、效力等的研究尚在积极的探索之中；由于生物毒素毒性较高，可发展成为一种潜在的生物武器， 对人类健康和国家安全构成了潜在的巨大威胁。因此，生物样品和环境样品中痕量生物毒素的检测已 成为各国关注的重点，发展毒素的检测、鉴别和防护手段也成为当前国际反恐工作的迫切需要。生物毒 素的分析检测早期主要通过动物实验、常规免疫方法及普通理化分析手段等进行。近年来，随着分析技 术的不断发展，生物质谱、色谱一质谱联用和各类新型传感技术越来越多地应用于生物毒素的检测中，使 生物毒素的定性与鉴别更加准确，分析的灵敏度和特异性也有很大地提高。本文就各类主要生物毒素 的分析检测技术方法及其最新研究进展进行分类概述。比较常见的几种生物毒素的结构见附图WWW． analchem．on／Figure／081000．pef。 2海洋生物毒素——河豚毒素和石房蛤毒素 有报道称在欧洲捕捞的海螺引发了河豚毒素中毒事件，该种属的海螺ITX含量惊人。1只可致lO个成 3—7，对热稳定，在强酸强碱条 年人死亡…。TTx不溶于有机溶剂，易溶于有机酸和无机酸水溶液，pH 件下不稳定，主要降解产物为C。碱。 毒素，小鼠LD，。为8阻g／kg。其分子式为C。。H。，N，0。，分子量299。纯品为白色固体，易溶于水，不易被消 化酶破坏。石房蛤毒素主要作用于突触前膜，可阻断突触后膜的Na+通道，导致一系列的中毒症状。 2．1生物测定法 细胞毒性法是检测STX常用生物测定法之一，主要基于STX作为钠通道阻断剂对细胞生物活性的 影响实现检测。Okumura等旧。通过加入刺尾鱼毒素(maitotoxin)，将孵育时间从l一2 d降至6—8h，实 现了快速细胞生物分析。应用神经瘤细胞建立的PSP的体外检测模型，测得几种PSP的毒性大小为： 2．2理化分析法 沈晓书等H1在Trx的荧光检测法中应用微波辅助碱解法提高TTX的水解速度和C。碱的产率。在 碱解体系中，以水和异丙醇作为混合溶剂使荧光强度得到显著提高，该方法可检测16 Trx。 pg／L 2008-09·19收穑；2008·i1-08接受 本文系国家自然科学基金(No资助项目 ·E-mail：Iiejw@nic．bmi．∞．cn 万方数据万方数据 第5期 暴铱等：生物毒素检测技术研究进展 765 液相色谱一质谱联用技术(LC．MS)可对rrIIx直接进行检测。对于全血和尿液等生物样品，以C。。或活 性炭固相萃取柱对样品进行预处理，结合液相色谱．电喷雾串级质谱(LC．MS／MS)可检测低于10∥L的 11Ⅸ¨。。GC-