首乌药材的HPLC指纹图谱的探究.pdfVIP

D32首乌药材的肿LC指纹图谱研究 刘旭徐江平游文玮杨雪梅。 南方医科大学药学院广州51(3515 yxmjp@sina．com 方法与结果 1色谱条件 色谱柱：Agilent Hypersil(250mX4．5mm，511m)c 一20：80(35min)_．30：70(45min)--80：20 v／v)：流速：lmL／min：柱温：30℃：检测 波长：254n1Il。 2HPLC供试品溶液的制各 滤液，用甲醇定容至lOml，过O．45um微孔滤膜，即得；另精密称取对照品lmg左右，置25ml 容量瓶，加甲醇溶解并稀释至刻度摇匀得对照品溶液(避光保存)：上述样品备HPLC分析使 用。 3测定指纹图谱的方法考察 3．1精密度实验 精密吸取首乌供试品溶液，连续进样5次，测定ItPLC色谱图，结果各共有峰相对峰面积 的RSD均小于1．61％，相对保留时间的RSD均小于0．75％，仪器精密度良好。 3．2稳定性实验 精密吸取同一批药材制各的供试品溶液，分别在放置0， 2， 4，8，12，24h后测定指 纹图谱， 结果各共有峰相对峰面积的RSD均小于2．02％，相对保留时间的RSD均小于0．93％， 表明样品在24h内稳定性良好。 3．3重现性实验 平行操作制各5份首乌供试品溶液，测定HPLC色潜图，结果各共有峰相对峰面积的RSD 均小于2．68％，相对保留时间的RsD均小于1．26％，方法重现性良好。 3．4指纹图谱的测定 取6批不同产地来源的首鸟供试样品，按2．1项F条件进行HPLC分析，实现r峰与峰之 间的良好分离，确定了7个共有峰(图1)。 图1首乌药村的指纹图潜 l HPM ofRadix Multlf』nrJ Fig fingerPrintFolygoM 3．5参照物的选择 在HPLC图谱中选择峰面积较大、出峰时间适中且稳定的色谱峰作为参照峰“，结果14．7 min的色谱峰符合此条件，经对照品对照确定为二苯乙烯苷的吸收峰，且二苯乙烯苷为首乌的 主要活性成分之一，故选择二苯乙烯苷作为参照物(S)。 3．5．1共有峰的相对保留时间 相对峰面秘指纹图谱相似度计算选取色谱图中的7强峰，由色谱工作站辅助自动进行峰 匹配，确定7个共有峰。以二苯乙烯苷色谱峰的保留时间和峰面积积分值为1，广东德庆、江 西赣州、广东肇庆、广西宜州、陕西汉阴、湖北宜昌，各共有峰的相对保留时间的RSI)％分别 2．33，1．20，l_5l，1．11．1．i0。 讨 论 中药化学成分的多样性与复杂性是其发挥疗效的物质基础，也是质量评价的难点与重点。 目前能较客观反映复杂体系中化学成分全貌的指纹图潜，是唯～获得国际认可的中药质量控 制技术，正得到普遍重视“。本实验建立了首乌药材HPLC指纹图谱，确定了7个共有峰，其 相对保留时间及相对峰面积的RSD均在3％以内，在此基础一}：确认了各共有峰的归属：计算了 指纹图谱的相似度，结果均在0．99以上，上述结果表明所建立的指纹图谱的技术指标稳定， 重现性好。 参考文献 Rao ZhouB and [IJ C H，LeiJEef日』Finger ofthetraditiona]Chinesemedicineit’s printtechnique application [J]，HeraldofMedicifie．2005．24(3)：218 [2】何文斐，李士敏中药色谱指纹图谱的研究进展[J]．时珍囝区国药，2003．14(4)：238